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上海酶聯(lián)生物研究所

我司教你如何依據(jù)抗體的類型和用處挑選合適的純化辦法

時間:2020-3-24閱讀:249
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在制備高特異性、高效價的抗體是實驗免疫學(xué)技術(shù)的基礎(chǔ),抗體質(zhì)量的高低將直接影響實驗的勝敗。 經(jīng)過不同辦法制備的抗體往往與多種雜蛋白稠濁在一起,為了取得成分相對單一的抗體或?qū)⒖贵w用于特定的用處,就需求進行抗體純化??贵w純化分了幾種類型,依據(jù)用處決議挑選哪種辦法進行純化:
      
1. 粗純:將制備抗體的血清或是腹水,細胞上清,直接用鹽析法進行處理,這樣能夠?qū)⑦@些物質(zhì)里邊的其他雜質(zhì)去掉,取得蛋白的成分,但是由于是粗純,里邊會混有大量的其他蛋白,這樣取得的抗體,純度較低,用于實驗中布景比較高。
       
2.通用型純化:用抗體結(jié)合蛋白Protein A,Protein G或者Protein L。因為不同來源的抗體和這些抗體結(jié)合蛋白的結(jié)合才能不同,所以需求依據(jù)抗體來源挑選運用哪種抗體將誒和蛋白。對于有一些單鏈抗體,則八成運用protein L來進行純化。經(jīng)過抗體結(jié)合蛋白的親和純化后,溶液中根本只保留了抗體的成分,其他蛋白都去掉了,抗體純度能夠比較高。
       
3.抗體特異型純化:但是有些抗體,需求純度特別高,特異性特別好,就不能簡略選用上述兩種辦法進行純化了。必須要經(jīng)過將抗原固定制備成特異的親和純化柱,再純化抗體。這個時候得到的就滿是針對一種抗原的抗體了,特異性。當(dāng)然,由于牽涉到抗原固定等操作,成本相應(yīng)是的。

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