血清稀釋用一般的PBS即可，可加1％的BSA，能有用下降ELISA本底，當(dāng)然假設(shè)你嫌費(fèi)事我覺(jué)得用生理鹽水代替PBS聯(lián)絡(luò)也不大。不管你是用直接比賽仍是間接比賽，血清的稀釋倍數(shù)必定要事先判定，但也不必一點(diǎn)點(diǎn)，你做一個(gè)預(yù)實(shí)驗(yàn)即可，選擇OD在1.0左右的稀釋倍數(shù)，即你的比賽ELISA中陰性孔OD在1.0，這樣作出來(lái)的曲線比較靈敏。

每一盒ELISA試劑盒里面都有一份對(duì)應(yīng)的說(shuō)明書(shū)，而每一份說(shuō)明書(shū)里都會(huì)有寫(xiě)樣本和稀釋液的稀釋比例，為什么樣本都需求稀釋呢?在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)血清為什么要稀釋？有兩個(gè)原因：
1）比賽克制比較明顯，應(yīng)稀釋比賽物；
2）以下降非特異性反應(yīng)，使特異性的抗原抗體反應(yīng)充分體現(xiàn)出來(lái)。

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)稀釋血清的進(jìn)程：
先把蛋白稀釋必定的倍數(shù)，比如說(shuō)10倍、20倍稀釋（這樣可以大體判定一個(gè)參數(shù)），將抗原進(jìn)行一系列稀釋包被微量反應(yīng)板，再用必定稀釋度的陽(yáng)性參看血清和陰性參看血清進(jìn)行孵育后洗刷，再加酶結(jié)合物進(jìn)行反應(yīng)，經(jīng)孵育洗刷后，加底物溶液顯色，中止反應(yīng)后別離測(cè)定O.D值，選擇O.D值≥1.0的那個(gè)抗原稀釋度為zui適包被濃度。一般總是要選擇那個(gè)O.D值稍大于1.0，而不選擇小于1.0的抗原濃度。陰性參看血清O.D值要求<0.1-0.2。也就是要求陽(yáng)性參看血清和陰性參看血清的O.D值有明顯不同。