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單克隆抗體藥物是利用淋巴細(xì)胞雜交瘤或基因工程技術(shù)制備得到的藥物，是生物制藥領(lǐng)域的重要組成部分。在抗腫瘤方面，單克隆抗體藥物通過(guò)干預(yù)腫瘤發(fā)生發(fā)展中的信號(hào)通路，或激活機(jī)體對(duì)腫瘤的免疫反應(yīng)，實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤的靶向殺傷作用。與傳統(tǒng)化療藥物相比，單克隆抗體藥物表現(xiàn)出專(zhuān)一性強(qiáng)、療效顯著的特點(diǎn)，因此在腫瘤治療中起到重要作用。此外，單克隆抗體藥物還用于自身免疫、心血管、感染等疾病的治療。據(jù)有關(guān)資料顯示，2015 年單克隆抗體藥物的銷(xiāo)售額已達(dá)到 980 億美元左右，而同年中國(guó)的單抗藥物市場(chǎng)已經(jīng)達(dá)到了 72 億人民幣，估計(jì)2020 年有望達(dá)到 200 億。

據(jù)美國(guó) FDA 規(guī)定，對(duì)人體使用的單克隆抗體藥物，其臨床前及臨床試驗(yàn)中需進(jìn)行藥代動(dòng)力學(xué)研究，包括藥物血漿濃度變化、體內(nèi)分布和清除率等。然而，生物基質(zhì)中單克隆抗體藥物的定量分析面臨巨大挑戰(zhàn)。如今對(duì)抗體藥物的檢測(cè)主要是采用 ELISA 試劑盒完成，但 ELISA 方法的缺點(diǎn)主要有開(kāi)發(fā)時(shí)間長(zhǎng)、準(zhǔn)確性一般、假陽(yáng)性率高、線性范圍窄。LC-MS/MS 方法可以很好地解決 ELISA 所存在的不足，而且靈敏度也滿(mǎn)足實(shí)際檢測(cè)需求，因此被越來(lái)越多地應(yīng)用于抗體藥物的檢測(cè)。但是其前處理方法不成熟常常導(dǎo)致選擇性和重現(xiàn)性不佳。

納米表面分子導(dǎo)向限制性酶解（nSMOL, nano-Surface and Molecular Orientation Limited Proteolysis）技術(shù)通過(guò)對(duì)抗體藥物 Fab 區(qū)域選擇性酶解，獲得靶標(biāo)蛋白特異性肽段，之后通過(guò)LC-MS/MS 方法對(duì)特異性肽段進(jìn)行檢測(cè)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)抗體藥物的定量分析。nSMOL 技術(shù)能確保獲得靶標(biāo)蛋白特異性肽段，同時(shí)盡可能降低樣品的復(fù)雜程度，從而表現(xiàn)出良好的選擇性和重現(xiàn)性。

島津公司作為的分析儀器綜合生產(chǎn)廠商，始終秉承創(chuàng)業(yè)宗旨“以科學(xué)技術(shù)向社會(huì)做貢獻(xiàn)”，不斷鉆研、滿(mǎn)足社會(huì)需求的科學(xué)技術(shù)。為了迎合客戶(hù)需求和行業(yè)發(fā)展趨勢(shì)，島津公司本應(yīng)用文集，匯總了當(dāng)前應(yīng)用 nSMOL 技術(shù)在期刊上發(fā)表的研究論文，以及島津公司基于 nSMOL 技術(shù)開(kāi)發(fā)的應(yīng)用文章。

主要內(nèi)容包括：

1. 基于nSMOL技術(shù)發(fā)表的SCI論文

Selective detection of complementarity-determining regions of monoclonal antibody by limiting protease access to the substrate: nanosurface and molecular-orientation limited proteolysis

The development of the validated LCMS bioanalysis of trastuzumab in human plasma using a selective detection method for complementarity determining regions of monoclonalantibodies: nano-surface and molecular orientation limited (nSMOL) proteolysis

Fully validated LCMS bioanalysis of Bevacizumab in human plasma using nano-surfaceand molecular-orientation limited (nSMOL) proteolysis

Application of nano-surface and molecular-orientation limited proteolysis to LC–MS bioanalysis of cetuximab

Validated LC–MS/MS analysis of immune checkpoint inhibitor Nivolumab in human plasma using a Fab peptide-selective quantitation method: nano-surface and molecular-orientation limited (nSMOL) proteolysis

Validated LC/MS Bioanalysis of Rituximab CDR Peptides Using Nanosurface and Molecular-Orientation Limited (nSMOL) Proteolysis.

2. 島津中國(guó)分析中心應(yīng)用報(bào)告

nSMOL前處理技術(shù)結(jié)合Skyline軟件加速抗體藥物L(fēng)CMS分析方法開(kāi)發(fā)

基于nSMOL技術(shù)和Skyline軟件的曲妥珠單抗LC-MS/MS定量分析方法開(kāi)發(fā)

nSMOL技術(shù)結(jié)合Skyline軟件對(duì)貝伐珠單抗藥物的UHPLC-MS/MS定量方法開(kāi)發(fā)

采用nSMOL試劑盒建立人血漿中貝伐珠單抗定量分析方法的重現(xiàn)性驗(yàn)證

nSMOL技術(shù)不同酶解緩沖體系對(duì)曲妥珠單抗靈敏度的影響

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