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1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>
通過(guò)細(xì)胞的體外培養(yǎng)來(lái)檢測(cè)產(chǎn)品的生物性能是否達(dá)到要求。
2.實(shí)驗(yàn)原理:
體外培養(yǎng)的細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過(guò)大生存空間不足而引起營(yíng)養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或l:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng)。通過(guò)貼壁細(xì)胞的傳代培養(yǎng),觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)可以反映出培養(yǎng)產(chǎn)品是否達(dá)到細(xì)胞培養(yǎng)的要求。
3.實(shí)驗(yàn)材料:
3.1 抽檢樣品:
3.2 細(xì)胞株:VERO細(xì)胞系:*貼壁細(xì)胞,主要用于接種病毒的一種細(xì)胞。
3.3 實(shí)驗(yàn)試劑:RPMI1640(8111031)、0.25%*(876536)、小牛血清(8187648)、都購(gòu)自廣州英韋創(chuàng)津生物試劑公司。
3.4 實(shí)驗(yàn)耗材:3ml的巴斯德吸管、酒精燈、鑷子、酒精棉球。
3.5 實(shí)驗(yàn)儀器:XDS-1倒置顯微鏡購(gòu)自廣州粵顯光學(xué)儀器科技有限公司;
超凈工作臺(tái)購(gòu)自蘇州凈化儀器設(shè)備公司;
4.實(shí)驗(yàn)步驟:
4.1. 在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和密度,取生長(zhǎng)良好的細(xì)胞若干瓶,棄掉舊培養(yǎng)液。
4.2. 加入*消化細(xì)胞,消化適度后倒去*。
4.3. 加入適量培養(yǎng)液反復(fù)吹打數(shù)次。
4.4. 細(xì)胞計(jì)數(shù)稀釋細(xì)胞密度為1×105/ml
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