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尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒簡介
從健康人尿中分離的,或從人腎組織培養(yǎng)中獲得的一種酶蛋白。由分子量分別為33000 (LMW-tcu-PA)和54000(HMW-tcu-PA)兩部分組成。本品直接作用于內(nèi)源性纖維蛋白溶解系統(tǒng),能催化裂解纖溶酶原成纖溶酶,后者不僅能降解纖維蛋白凝塊,亦能降解血循環(huán)中的纖維蛋白原、凝血因子Ⅴ和凝血因子Ⅷ等,從而發(fā)揮溶栓作用。本品對新形成的血栓起效快、效果好。本品還能提高血管ADP酶活性,抑制ADP誘導(dǎo)的血小板聚集,預(yù)防血栓形成。本品在靜脈滴注后,患者體內(nèi)纖溶酶活性明顯提高;停藥幾小時后,纖溶酶活性恢復(fù)原水平。
尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒的顯色與比色
顯色
顯色是ELISA試驗中zui后一步溫育反應(yīng),此時酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應(yīng)的溫度和時間仍是影響顯色的因素。適當提高溫度,有助于加速顯色。在一定時間內(nèi),陰性孔可保持無色,而陽性孔則隨時間的延長而呈色加強。在定量檢測中,加入底物后的反應(yīng)溫度和時間應(yīng)按規(guī)定力求準確。ELISA顯色結(jié)果通過酶標儀進行,可減少實驗誤差,提高臨界值樣本的分析準確度。盡量避免肉眼直接判斷結(jié)果,因為不同個體的視覺存在差異。應(yīng)注意,加顯色劑時,要保持顯色劑不外流。加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生較多氣泡,否則可能使假陽性結(jié)果的出現(xiàn)概率增加。
比色
比色的方法有目視法和酶標比色法2種。目視法簡單明了,但對同一標本,操作者的不同有時會出現(xiàn)不同的結(jié)果,具有一定的主觀性。比色的結(jié)果通常用光密度表達,現(xiàn)按規(guī)定用吸光度表達。酶標儀不應(yīng)安置在陽光或強光照射下,操作時的適宜室溫在15℃~30℃之間,使用前要先預(yù)熱儀器15~30min,使測得結(jié)果更為準確。比色前,應(yīng)先用潔凈的吸水紙擦拭干凈板底附著的液體,然后將板正確放在酶標比色儀的比色架上。綜上所述,的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結(jié)果準確可靠的必要條件。在實際應(yīng)用過程中,操作者必須熟練掌握基本操作技能,對每個環(huán)節(jié)進行嚴格仔細的核查,盡量避免假陽性和假陰性反應(yīng)的出現(xiàn),保證檢測結(jié)果真實可靠,為診斷和疾病防治提供可靠的理論依據(jù)。
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