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中級(jí)會(huì)員 | 第10年

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ELISA試劑盒的檢測(cè)原理

時(shí)間:2017-3-6閱讀:616
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ELISA試劑盒的檢測(cè)原理
ELISA試劑盒TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成究竟的黃色。
用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),經(jīng)過規(guī)范曲線核算樣品中牛甘露糖聯(lián)絡(luò)蛋白C(MBL2)濃度。 
本試劑盒運(yùn)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中牛甘露糖聯(lián)絡(luò)蛋白C(MBL2)水平。
用純化的牛甘露糖聯(lián)絡(luò)蛋白C(MBL2)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中順次參與甘露糖聯(lián)絡(luò)蛋白C(MBL2),再與HRP符號(hào)的甘露糖聯(lián)絡(luò)蛋白C(MBL2)抗體聯(lián)絡(luò),構(gòu)成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗刷后加底物TMB顯色。
色彩的深淺和樣品中的甘露糖聯(lián)絡(luò)蛋白C(MBL2)呈正有關(guān)。
濃洗刷液或許會(huì)有結(jié)晶分出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗刷時(shí)不影響作用。
各步加樣均應(yīng)運(yùn)用加樣器,并常常校正其準(zhǔn)確性,以避免實(shí)驗(yàn)過失。
ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可運(yùn)用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保留。
一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,引薦運(yùn)用排槍加樣。
請(qǐng)每次測(cè)定的一起做規(guī)范曲線,做復(fù)孔。
如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于規(guī)范品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋必定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,核算底物請(qǐng)避光保留。
嚴(yán)厲按照說明書的操作進(jìn)行,實(shí)驗(yàn)作用斷定有必要以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
時(shí)請(qǐng)畢竟乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。
全部樣品,洗刷液和各種廢棄物都應(yīng)按感染物處理。
封板膜只限一次性運(yùn)用,以避免穿插污染。
ELISA試劑盒不一樣批號(hào)組分不得混用。

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