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ELISA試劑盒實驗的影響因素
咱們技術(shù)人員通過幾年的試驗調(diào)查,以為影響ELISA試驗的要素有如下三方面:
一、試劑盒
1、抗原、抗體活性對效價的影響:主要是試劑中抗體(或抗原)的效價下降或失活,成果不易判別。再有ELISA試劑盒靈敏度高,對雜質(zhì)的反響靈敏度也高,試驗中空白對照OD值偏高或假陽性;
2、酶物濃度過高,也會致使OD值假性增高。
二、ELISA試劑盒試驗儀器
1、加樣器是不是通過校正,酶免測定血清用血量很少,如手工加樣器的功能欠好,汲取樣品不,會使成果忽高忽低;
2、每次洗板前,應(yīng)查看洗板機(jī)針孔有無堵塞。
三、操作
1、檢查前先將試劑盒從冰箱取出置室溫平衡20min后運用,試劑用完及時放回冰箱冷藏,避免形成試驗成果假性下降;
2、加樣時留意勿觸及包被板底部,避免擦傷包被物使抗體(抗原)掉落而影響試驗成果的性;
3、洗刷不充分,會使成果假性增高,過分洗刷呈假陰性;
4、比色時應(yīng)堅持包被孔底部無異物、無水汽,特別是冬天板從37℃水浴箱取出時,底部留有水汽,應(yīng)將板底擦干后進(jìn)行比色,水汽或孔內(nèi)氣泡也會使OD值增加;
5、抗原與抗體反響到達(dá)*平衡,依賴于溫度與時刻。溫度高于45℃易引起失活及符號物掉落,溫度低于4℃,影響反響速度。
總歸,由于ELISA試劑盒試驗的影響要素較多,在實際工作中有必要操作標(biāo)準(zhǔn)、細(xì)心,避免和掃除各種要素的影響,使之得到牢靠的查驗成果。
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