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大鼠冠狀動脈平滑肌細胞培養(yǎng)條件:DMEM(高糖)+10%FBS,傳代方法:按1:3傳代,凍存條件:90%FBS+10%DMSO,規(guī)格:25T,產品復蘇率:60培養(yǎng)兩天就能清晰看到軸突與樹突,培養(yǎng)時間可長達13-16天,質量控制:嚴格經過了細菌、真菌、霉菌、病毒(HIV、HBV、HCV)、支原體檢測,產品庫存:現貨供應。
大鼠冠狀動脈平滑肌細胞具體操作:
1).首先不加*,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍,(這是前奏,即為*步,目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。
2).然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面*消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對*的敏感度了。)
3).吸干凈瓶內剩余液體,加入0.3ml左右的*潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的*消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察,待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉*與干凈彈頭里備用,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(你也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對比。)這是第三步。
4).然后把前面剛吸出來的*重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的*,如果你們那比較富裕的話,呵呵。繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細胞間隙明顯,細胞獨立開來的時候,吸掉*,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據實際情況你自己把握)。這是第四步。
其實還可以有第五步,對于特別難消化的細胞和對*特別敏感的細胞的話,你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài),更漂亮的樣子,沒辦法,你必須分多批多次消化,這樣才能zui大限度地將*對細胞的損傷降到zui低,保證細胞的狀態(tài)能夠*。
3T3L1 小鼠胚胎成纖維細胞(前脂肪)
3T6swiss 小鼠胚胎成纖維細胞
BA/F3 小鼠原B細胞
BHK-21 金黃地鼠腎
BS-C-1 非注洲綠猴腎
C2C12 小鼠成肌細胞
C3H 10T1/2 2A6 小鼠成纖維細胞
CHOdhfr 二氫*缺陷型中國倉鼠卵巢細胞
CHO-K1 中國倉鼠卵巢細胞
COS-1 非洲綠腎
COS-7 非洲綠猴腎細胞
CV-1 猴腎細胞
IAR20 小鼠肝細胞
IEC-6 大鼠小腸隱窩上皮細胞
LL-PK1, 豬腎細胞
MC3T3-E1 小鼠胚胎成骨細胞
MDCK 狗腎細胞
MEF 小鼠胚胎成纖維細胞
NIH3T3 小鼠胚胎成纖維細胞
P815 小鼠肥大細胞
PA12 小鼠成纖維細胞
RTE 大鼠氣管上皮細胞
SF9 昆蟲卵巢細胞
SMC 兔主動脈平滑肌細胞
Vero 猴腎細胞
WEHI-3 小鼠血液細胞
Y2 小鼠成纖維細胞
L6 大鼠骨骼肌成肌細胞
NRK 小鼠結締組織細胞
AtT-20 小鼠垂體瘤
BC3H1, 鼠腦瘤
BV-2 小鼠小膠質瘤細胞
C6 大鼠腦膠質瘤
Cyc-tAg 小鼠T淋巴細胞瘤(SV40T抗原轉染)
EL-4 鼠T淋巴細胞瘤
FOX-NY 小鼠淋巴瘤細胞
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