白堊立克次氏體PCR試劑盒步驟注意事項(xiàng)：
1．基礎(chǔ)程序；
2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；
3．反應(yīng)時(shí)間；
4．循環(huán)次數(shù)；
5．PCR 反應(yīng)液的配制；
6．PCR技術(shù)的基本原理；
7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；
8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；
9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

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以下是白堊立克次氏體PCR試劑盒步驟的詳細(xì)說(shuō)明書：

使用方法：
注：白堊立克次氏體PCR試劑盒步驟所有試劑使用前需*解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書；陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取，可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）
取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣（樣本處理區(qū)）
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。

以下是白堊立克次氏體PCR試劑盒步驟的相關(guān)產(chǎn)品，了解更多進(jìn)口PCR試劑盒點(diǎn)擊進(jìn)入。

 原代內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml

IL20RB Others Rat 大鼠 IL20RB 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

大鼠子宮平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

CHO-K1倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞亞株 CHO-K1 Chinese hamster ovary cell subline F-12K+10%FBS

胰島素樣生長(zhǎng)因子

E.G7-OVA(小鼠T淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人卵巢成纖維細(xì)胞HOF

RDFs, 大鼠真皮成纖維細(xì)胞 Rattus

CM-H048人胃粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

大鼠腦膜細(xì)胞(RMC)(5×105)

小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a] 小鼠卵巢顆粒細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

人肝永生化細(xì)胞;THLE-3

FGFR1 Others Mouse 小鼠 FGFR1 / CD331 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基   100mL

人小腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基   100mL

人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基   100mL

人直結(jié)腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基   100mL

卵黃多粘菌素瓊脂基礎(chǔ)（MYP）  英文名稱；  Mannitol-Egg-Yolk-Polymyxin Agar Base  規(guī)格；  250g

胰酪胨大豆多粘菌素肉湯基礎(chǔ)  英文名稱；  Trypticase-Soy-Polymyxin Broth Base  規(guī)格；  250g

改良V-P培養(yǎng)基  英文名稱；  V-P Medium,Modified  規(guī)格；  250g

胰酪胨大豆羊血瓊脂基礎(chǔ)  英文名稱；  Trypticase Soy Sheep Blood Agar Base  規(guī)格；  250g

酪蛋白瓊脂  英文名稱；  Casein Agar  規(guī)格；  250g

假單胞cfc選擇性培養(yǎng)基  Pseudomonas CFC Selective Agar  250g

可溶性淀粉培養(yǎng)基  Soluble Starch Medium  250g

AK瓊脂（2號(hào)）  AK Agar（No.2）  250g

牛肝顆粒    100g

運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單胞菌T培養(yǎng)基  Zymomonas Mobilis T Medium  250g

白堊立克次氏體PCR試劑盒步驟RVS肉湯  用于食品中沙門氏菌檢驗(yàn)選擇性增菌(ISO標(biāo)準(zhǔn))用途:用于沙門氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)。用法稱取本品 27.1g,加熱攪拌溶解于 1000ml 蒸餾水中,充分混勻,分裝,121℃高壓滅菌 15 分鐘,保存于 4 -10℃冰箱,備用。注:放置于 42℃水浴培養(yǎng)。

MKTTn肉湯（ISO）  用于食品中沙門氏菌檢驗(yàn)選擇性增菌(ISO標(biāo)準(zhǔn))用途:用于食品中沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)。用法稱取本品 89.5g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,迅速冷卻,此溶液在 2-8℃可保存 4 周,臨用前加入 20ml液(5g 溶解于 2ml蒸餾水,然后加入 4g ,加蒸餾水至 20ml),混勻,分裝試管,每管 10ml,當(dāng)天制備當(dāng)天使用,無(wú)需高壓滅菌。

賴氨酸鐵瓊脂（LIA）  用于食品中沙門氏菌生化試驗(yàn)(FDA標(biāo)準(zhǔn))用途:用于同時(shí)檢測(cè)腸桿菌科細(xì)菌的賴氨酸脫羧酶和產(chǎn)試驗(yàn),特別用于檢測(cè)沙門氏菌和亞利桑那菌。用法稱取本品 32.0g ,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝于 13x100mm 試管中,每管4ml。121℃高壓滅菌 15 分鐘,冷至 60℃時(shí),制成斜面,斜面長(zhǎng) 2.5cm,底部長(zhǎng) 4cm。

改良MSRV培養(yǎng)基  用于沙門氏的分離培養(yǎng)（MERCK方法）用于沙門氏的分離培養(yǎng)（MERCK方法）產(chǎn)品用法：稱取本品 32.0g,加熱溶解于1000ml 蒸餾水中,煮沸1 分鐘,冷至 50℃左右時(shí), 每 200ml 培養(yǎng)基中加 1 支改良 MSRV 添加劑(新生霉素 2mg),混勻,傾入無(wú)菌平皿,備用。使用時(shí),正置培養(yǎng),采用點(diǎn)觸法接種。注：無(wú)需高壓滅菌。貯存方法：請(qǐng)放置陰涼干燥處保存

需要自備的器材：
1．白堊立克次氏體PCR試劑盒步驟儀器：分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
特點(diǎn)：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡(jiǎn)單，定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化，特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽(yáng)性對(duì)照，便于分析試驗(yàn)結(jié)果。