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小鼠胚胎成纖維細胞;Psi2DAP

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所  在  地上海市

更新時間:2021-12-28 17:07:42瀏覽次數(shù):711次

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產(chǎn)品名稱

小鼠胚胎成纖維細胞;Psi2DAP

生長特性

貼壁生長

貨號

EY-X63908

細胞名稱  小鼠胚胎成纖維細胞;Psi2DAP
形態(tài)特性: 成纖維細胞

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 這這株細胞生成一種可以感染小鼠細胞的載體。Psi2DAP細胞生成的載體編碼了人類胎盤堿性磷酸酯酶基因和*抗性基因。這株細胞通過Psi2細胞插入一個重組的逆轉(zhuǎn)錄病毒(DAP)基因組衍生而來。被這種Psi2DAP產(chǎn)生的載體感染的細胞表達的磷酸酯酶可用組織化學方法檢測,可以用作體內(nèi)追蹤他們命運的標記。這些細胞也可能產(chǎn)生輔助病毒。檢測輔助病毒的方法或其他逆轉(zhuǎn)錄病毒技術(shù),請參考Cepko,C.L.Lineageanalysisandimmortalizationofneuralcellsviaretroviru

培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%

傳代方法: 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。

傳代情況: PN5

凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 陰性
?
產(chǎn)品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設備。
2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括*蛋白酶、半*酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。 
培養(yǎng)操作步驟
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片); 
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時; 
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中; 
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%*消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生的細胞,以0.25%*消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生的細胞用*消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。
趨化因子配體3檢測試劑盒細胞名稱: 珍珠龍膽石斑魚吻端組織細胞系;PGSN形態(tài)特性: 上皮樣ELISA Kit for ChemokineLigand 3

牙本質(zhì)磷蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 鞍帶石斑魚腎臟組織細胞系;GGKD形態(tài)特性: 上皮樣dentin phosphoprotein

牙本質(zhì)涎蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 草魚背鰭組織細胞系;GCDF形態(tài)特性: 上皮樣human dentin sialoprotein

順烏頭酶1檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;9G2.5形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣aconitase 1

丙激酶同工酶R;L檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;H1A2形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Pyruvate kinase isozymes R;L

CD320分子檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;2F8形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Cluster of differentiation 320

β2轉(zhuǎn)鐵蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;F3A2形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣β2 transferrin

性別決定區(qū)Y框蛋白1檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;CH3形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣SOX-1

骨骼肌肌動蛋白α1檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;2F2形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣smActinin-α1

α橫紋肌肌動蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;4G1形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣α-sarcomeric actin

脊髓灰質(zhì)炎病抗體檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;1C8形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣poliovirus antibody

乙型流感嗜血桿菌抗體檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;4F2形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Haemophilus influenzae type b antibody

腦膜炎雙球菌抗體檢測試劑盒細胞名稱: 人癌多藥耐藥細胞株;MCF-7/ROS形態(tài)特性: 上皮樣Neisseria meningitidis antibody

囊泡單胺轉(zhuǎn)運蛋白2檢測試劑盒細胞名稱: 穩(wěn)定表達GFP的shRNA靶向干擾YB-1基因人肺腺癌A549細胞株;A549/YBX1-homo-326形態(tài)特性: 上皮樣Vesicular Monoamine Transporter 2

無翅型MMTV整合位點家族成員11檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;1H9形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 11

5-羥色胺受體1B檢測試劑盒細胞名稱: 分泌抗豬SC蛋白單克隆抗體的雜交瘤細胞株;4H11形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣5-Hydroxytryptamine Receptor 1B

抗*抗體檢測試劑盒細胞名稱: 過表達CADM1的骨肉瘤細胞株;U-2os-CADM1形態(tài)特性: 上皮樣Anti trypsin antibody
小鼠胚胎成纖維細胞;Psi2DAP長春質(zhì)2468-21-5英文名:Catharanthine  

英文別名:(+)-3,4-Didehydrocoronaridine  

CAS登錄號:2468-21-5

分子式:C21H24N2O2

分子量:336.42

分子結(jié)構(gòu):

規(guī)格:20mg/支

純度:≥ 98%

用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。

提取來源:夾竹桃科植物長春花Catharanthus roseus (L.)G.Don的全草

藥理藥效:止痛、消炎、安眠、通便及利尿等。

貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光

有效期: 2年 

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