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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2021-04-07 15:12:24瀏覽次數(shù):679次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 環(huán)保在線公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長(zhǎng)特性 | 貨號(hào) |
乳腺癌細(xì)胞;MDA-MB-415 | 貼壁生長(zhǎng) | EY-X63842 |
細(xì)胞名稱 乳腺癌細(xì)胞;MDA-MB-415
形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性: 該細(xì)胞源于一名38歲患有乳腺腺癌女性的胸腔積液,細(xì)胞表達(dá)WNT7B癌基因。
培養(yǎng)條件: L15:LeibovitzMedium15%FBS;10mcg/mlinsulin+10mcg/mlglutathione
傳代方法: 1:2傳代,每周換液2~3次
傳代情況: P38
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè): 培養(yǎng)法(-)
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
A組鏈球菌多糖抗原檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 大鼠肺成纖維樣細(xì)胞;RL1形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣A Streptococcal Polysaccharide Antigens
Delta-like ligand 3檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 社鼠肺成纖維樣細(xì)胞;CWBRL2形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣Delta-like ligand 3
抗肌內(nèi)膜IgA抗體檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 社鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞;CWBRS2形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣anti-Endomysial antibody IgA
肌動(dòng)蛋白抗體IgA檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 花鼠肌肉成纖維樣細(xì)胞;CHPM1形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣Actin IgA
結(jié)構(gòu)特異性核酶FEN1檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 花鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞;CHPS1形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣flapendo;exonuclease
IgG Fc片段檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 花鼠腎上皮樣細(xì)胞;CHPK3形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣IgG-Fc
登革熱病IgG抗體檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 銀星竹鼠肌肉成纖維樣細(xì)胞;HBRM1形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣Dengue virus IgG
登革熱病IgM抗體檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 銀星竹鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞;HBRS2形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣Dengue virus IgM
Vasorin蛋白檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 樹鼩肺成纖維樣細(xì)胞;TSHL3形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣Vasorin
T 鈣粘蛋白檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 家兔腎細(xì)胞;RABK3形態(tài)特性: 上皮樣truncated-cadherin
甲羥戊激酶檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 樹鼩肌肉成纖維樣細(xì)胞;TSHR1形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣mevalonate kinase
胃癌抗原MG7檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 姬鼠皮膚細(xì)胞;FMS1形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣MG7-Antigen
III檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 樹鼩皮膚成纖維樣細(xì)胞;TSHS4形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣coagulation factor III
IV檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 樹鼩腎上皮樣細(xì)胞;TSHK3形態(tài)特性: 上皮樣coagulation factor IV
鈣結(jié)合蛋白B1檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 小菊頭蝠皮膚成纖維樣細(xì)胞;LHBS3形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣Calretinin B1
elabela檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 小菊頭蝠肺成纖維樣細(xì)胞;LHBL2形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣Elabela
斑聯(lián)蛋白檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 小菊頭蝠肌肉成纖維樣細(xì)胞;LHBM4形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣zyxin
乳腺癌細(xì)胞;MDA-MB-415柳穿魚黃素520-12-7英文名:Pectolinarigenin
英文別名:5,7-dihydroxy-6-methoxy-2-(4-methoxyphenyl)-4-benzopyrone
CAS登錄號(hào):520-12-7
分子式:C17H14O6
分子量:314.29
分子結(jié)構(gòu):
外觀:黃色結(jié)晶
規(guī)格:20 mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測(cè)定/鑒定/藥理實(shí)驗(yàn)等。
提取來(lái)源:菊科植物飛機(jī)草Eupatorium odoratumL.
溶解性:可溶于DMSO、熱,不溶于等溶劑。
熔點(diǎn):204~205℃
藥理藥效:具有一定抗氧化、消炎作用。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
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