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Fractalkine DRGelisa試劑盒說明書

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更新時間:2019-01-15 15:37:26瀏覽次數(shù):440次

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Fractalkine DRGelisa試劑盒說明書

Human Fractalkine ELISA Kit

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人FractalkineDRGelisa試劑盒 Human Fractalkine ELISA Kit
Fractalkine DRGelisa試劑盒說明書【實驗用途】Fractalkine,亦稱CX3CL1。是新發(fā)現(xiàn)的細胞趨化因子。人的CX3CL1編碼397個氨基酸,其中只有76個氨基酸的細胞趨化功能區(qū)。Fractalkine是一種CX3C趨化因子,經(jīng)FK基因修飾的3LL肺癌細胞(3LL2FK)能產(chǎn)生可溶性及膜結(jié)合型FK ,3LL2FK體內(nèi)應用后腫瘤部位CD+4,CD+8T細胞及DC浸潤明顯增加; 3LL2FK培養(yǎng)上清液能募集DC(DC表達CX3CR1),同時不成熟DC也向3LL2FK聚集,接觸3LL2FK的DC其表型趨于成熟, IL212表達增加,腫瘤組織內(nèi)IL22,IFN2γ表達增加。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。預先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)(biotin)標記。樣品和標記抗體先后加入酶標板孔反應后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應;經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關。
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操作流程:
(1)Fractalkine DRGelisa試劑盒說明書待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。 
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
(6)洗板,同(4)。 
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
(9)洗板,同(4)。 
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。 
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。 
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
試劑盒組成及試劑配制 :
1.Fractalkine DRGelisa試劑盒說明書 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。 
2. 標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶
4. 標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
NeurabinⅠ蛋白NRB1檢測試劑盒 規(guī)格: 48T/96T

Neurensin 1蛋白NRSN1檢測試劑盒 規(guī)格: 48T/96T

Neurensin 2蛋白NRSN2檢測試劑盒 規(guī)格: 48T/96T

Neurobeachin蛋白NBEA檢測試劑盒 規(guī)格: 48T/96T

Neuroguidin蛋白NGDN檢測試劑盒 規(guī)格: 48T/96T

Neuronatin蛋白NNAT檢測試劑盒 規(guī)格: 48T/96T

血管生成素2ANGPT2檢測試劑盒 規(guī)格: 48T/96T

血管生成素2ANGPT2檢測試劑盒 規(guī)格: 48T/96T

血管生成素4ANGPT4檢測試劑盒 規(guī)格: 48T/96T

血管生成素4ANGPT4檢測試劑盒 規(guī)格: 48T/96T

血管生成素4ANGPT4檢測試劑盒 規(guī)格: 48T/96T

血管生成素樣蛋白1ANGPTL1檢測試劑盒 規(guī)格: 48T/96T
孔雀綠草酸鹽 25克 進口/國產(chǎn)

孔雀綠 100克 進口/國產(chǎn)

克氏鐵瓊脂斜面平板 1米 進口/國產(chǎn)

克氏鐵瓊脂 25克 進口/國產(chǎn)

克氏雙糖鐵瓊脂(下層) 5米 進口/國產(chǎn)

克氏雙糖鐵瓊脂(上層) 150米 進口/國產(chǎn)

克氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基 5毫升 進口/國產(chǎn)

克雷伯氏顯色培養(yǎng)基 支 進口/國產(chǎn)

柯凡克試劑 1米 進口/國產(chǎn)

柯柏膠 1克 進口/國產(chǎn)

考馬斯亮藍R250 5克 進口/國產(chǎn)

考馬斯亮藍G250 1克 進口/國產(chǎn)

抗酸染液 40片/箱 進口/國產(chǎn)

抗生素Ⅷ號培養(yǎng)基 100克 進口/國產(chǎn)

抗生素Ⅵ號培養(yǎng)基 100克 進口/國產(chǎn)
Fractalkine DRGelisa試劑盒說明書星形細胞生長添加物   AGS 原裝/進口 200 µg

小膠質(zhì)細胞生長添加物   MGS  200 µg

巨噬細胞生長添加物   MGS * 10 µg

PEpiCM 前列腺上皮細胞培養(yǎng)基 * 規(guī)格: 500 ml 原裝/進口 5 x 10^5 cells/vial

CEpiCM 角膜上皮細胞培養(yǎng)基 * 規(guī)格: 500 ml  5 x 10^5 cells/vial

OEpiCM 卵巢上皮細胞培養(yǎng)基 * 規(guī)格: 500 ml * 20 reactions

MSCM-sf 間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基 * 規(guī)格: 500 ml 原裝/進口 200 µg

MCDM 間充質(zhì)干細胞軟骨細胞分化培養(yǎng)基 * 規(guī)格: 500 ml  200 µg

 

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