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更新時(shí)間:2019-01-16 17:17:46瀏覽次數(shù):573次
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cTnI DRGelisa試劑盒說(shuō)明書(shū)服務(wù)承諾:
一、質(zhì)量保證,有問(wèn)題免費(fèi)包換;
二、提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)(為客戶提供來(lái)樣檢測(cè)服務(wù),zui大限度實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效性);
三、提供全程技術(shù)指導(dǎo)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 價(jià)格 |
cTnI DRGelisa試劑盒說(shuō)明書(shū) | Human cTnI ELISA Kit | 來(lái)電可享受優(yōu)惠 |
人肌鈣蛋白I(cTnI)DRGelisa試劑盒 Human cTnI ELISA Kit
cTnI DRGelisa試劑盒說(shuō)明書(shū)【實(shí)驗(yàn)用途】CTnI肌鈣蛋白I,TnI是肌肉舒縮的分子開(kāi)關(guān),當(dāng)胞漿內(nèi)鈣離子濃度較低時(shí),TnI的抑制區(qū)域(C末端12個(gè)氨基酸;cTnI137-148)與肌動(dòng)-原肌球蛋白緊密結(jié)合,橫橋三磷酸腺苷酶(ATPase)失活,細(xì)肌絲被關(guān)閉,肌肉處于舒張狀態(tài)。當(dāng)鈣離子濃度升高到一定程度時(shí), TnC與鈣離子結(jié)合,導(dǎo)致其構(gòu)型發(fā)生改變,并將此效應(yīng)傳遞到肌鈣蛋白,TnI的構(gòu)型隨之發(fā)生改變,與肌動(dòng)-原肌球蛋白脫離,抑制作用被解除,橫橋ATPase被激活,細(xì)肌絲發(fā)生滑動(dòng),肌肉表現(xiàn)出收縮性。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒(ELISA)。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測(cè)相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)(biotin)標(biāo)記。樣品和標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng);經(jīng)過(guò)PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測(cè)因子呈正相關(guān)。
試劑盒組成及試劑配制 :
1.cTnI DRGelisa試劑盒說(shuō)明書(shū) 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶
4. 標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
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操作流程:
(1)cTnI DRGelisa試劑盒說(shuō)明書(shū)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。
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人可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)Elisa Kit *
人可溶性磷脂酶A2(sPL-A2)ELISA Kit *
人可溶性凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)ELISA Kit *
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人可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA Kit *
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人可溶性血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA Kit *
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人可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物(SFMC)ELISA Kit *
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cTnI DRGelisa試劑盒說(shuō)明書(shū)腦成纖維細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞 * 20 reactions
腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞 原裝/進(jìn)口 200 µg
腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞 200 µg
腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞 * 10 µg
腎成纖維細(xì)胞 原裝/進(jìn)口 5 x 10^5 cells/vial
腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 * 5 x 10^5 cells/vial
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