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BAFF DRGelisa試劑盒說明書

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更新時間:2019-01-21 15:38:05瀏覽次數(shù):606次

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BAFF DRGelisa試劑盒說明書

Mouse BAFF ELISA Kit

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小鼠B細胞活化因子(BAFF)DRGelisa試劑盒 Mouse BAFF ELISA Kit
BAFF DRGelisa試劑盒說明書【實驗用途】B細胞活化因子(B cell activating factor belonging to the TNF family,BAFF), B細胞活化因子是維持B細胞穩(wěn)態(tài)及體液免疫平衡的一種基本成分.它的異??梢痼w液免疫失衡而誘發(fā)多種自身抗體的產(chǎn)生.多種自身免疫性疾病如干燥綜合征、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風濕關(guān)節(jié)炎等,發(fā)病與B細胞活化因子的過表達密切相關(guān).B細胞活化因子與其受體有望成為治療自身免疫性疾病的一個新靶點。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。預先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)(biotin)標記。樣品和標記抗體先后加入酶標板孔反應后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應;經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。
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操作流程:
(1)BAFF DRGelisa試劑盒說明書待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。 
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
(6)洗板,同(4)。 
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
(9)洗板,同(4)。 
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。 
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。 
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
試劑盒組成及試劑配制 :
1.BAFF DRGelisa試劑盒說明書 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。 
2. 標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶
4. 標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
NP40 Lysis Buffer(NP40裂解液)  *

NP40 Lysis Buffer,High Salt(高鹽型NP40裂解液)  *

NP40 Lysis Buffer,Low Salt(低鹽型NP40裂解液)  *

NP40 Permeating Solution in PBS,10X(NP40滲透液,10X)  *

NP40 Permeating Solution in TBS,10X(NP40滲透液,10X)  *

Nylon Membrane Stripping Buffer,10X(尼龍膜剝離緩沖液,10X)  *

Orange-G Loading Dye (6X, Glycerol based)  *

Orange-G/Blue Dye (6X,triple tracker,Ficoll based)  *

Orange-G/Blue Dye (6X,triple tracker,Glycerol based)  *

Para-formaldehyde fixative Solution  *

Para-formaldehyde in PBS with Mg++ and EGTA,4%  *

Para-formaldehyde in Phosphate Buffer  *
Bromocresol purple sodium salt分子式:C21H15BR2NAO5S分子量:562.20

Bromocresol purple分子式:C21H16BR2O5S分子量:540.24  562.20

Bromocresol purple分子式:C21H16BR2O5S分子量:540.24  562.20

Bromocresol purple分子式:C21H16BR2O5S分子量:540.24  562.20

Bromofenoxim分子式:C13H7BR2N3O6分子量:461.02

Bromophenol blue sodium salt分子式:C19H9BR4NAO5S分子量:691.94

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Bromophenol blue分子式:C19H10BR4O5S分子量:669.96

Bromophenol blue分子式:C19H10BR4O5S分子量:669.96

Bromophenol blue分子式:C19H10BR4O5S分子量:669.96

Bromophenol blue分子式:C19H10BR4O5S分子量:669.96

Bromophenol blue分子式:C19H10BR4O5S分子量:669.96

Bromophenol red分子式:C19H12BR2O5S分子量:512.17

Bromophenol red分子式:C19H12BR2O5S分子量:512.17

Bromophos-ethyl分子式:C10H12BRCL2O3PS分子量:394.05

Bromophos-methyl分子式:C8H8BRCL2O3PS分子量:366.00

Bromophos-methyl分子式:C8H8BRCL2O3PS分子量:366.00

Bromophos-methyl分子式:C8H8BRCL2O3PS分子量:366.00

Bromopropylate分子式:C17H16BR2O3分子量:428.12
BAFF DRGelisa試劑盒說明書體液基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-7)活性熒光定量檢測試劑盒20次*

體液基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-7)活性比色法定量檢測試劑盒20次*

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