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細胞名稱  人小細胞肺癌細胞；NCI-H446費用
形態(tài)特性 上皮樣

生長特性 貼壁/懸浮生長，混合

特征特性 該細胞是1982年由Carney D和Gazdar AF等從一位小細胞肺癌患者的胸腔積液中建立的。細胞的原始形態(tài)并不具有小細胞肺癌特征。這個細胞株是小細胞肺癌的生化和形態(tài)學上的變種，表達神經(jīng)元*的烯醇酶和腦型肌酸激酶同工酶；脫羧酶、蠶素、抗利尿激素、催產(chǎn)素或胃泌激素釋放肽未達到可檢測水平。與正常細胞相比，該細胞c-myc DNA序列擴增約20倍，RNA增加15倍。初傳代培養(yǎng)基用含有5%FBS的RPMI1640，另外添加10 nM氫化可
細胞培養(yǎng)步驟：
一．人小細胞肺癌細胞；NCI-H446費用培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
注意事項：
1.收到人小細胞肺癌細胞；NCI-H446費用后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)絡(luò)。
2.收到細胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時（視細胞密度而定）穩(wěn)定細胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收細胞時就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態(tài)，100*，200*各一張），觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據(jù)。
3.由于細胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐ＷC客戶收到細胞后一周內(nèi)的細胞狀態(tài)，故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明，期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
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溴化芐Benzyl bromideCP100ml

ER0821MboII300 units6

P6782-10mgPeroxidase, Horseradish (HRP) 辣根過氧化物酶9003-99-010mg

BCA蛋白濃度測定試劑盒100T

Malate Dexy7nogenase25KU

有機擔體402402 organic supportGC80-100目25g

ER0932Bsp1407I (BsrGI)1500 units11

D2510-50GDexy7nocholic 脫氧膽酸201-478-550g

CHES100g

500g

大鼠血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人線粒體呼吸鏈復合物I 免疫試劑盒 Human mitochondrial respiratory chain complex I ELISA kit

葡萄糖氧化酶(GOD)測試盒 可見分光光度法 50管/48樣

Ratmuscarinicacetylcholinereceptor,M-AChRELISA試劑盒大鼠受體(M-AChR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanHepatitisDvirusIgM,HDVIgMELISA試劑盒人戊型肝炎病毒IgM(HEV-IgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

humanlungcancerMarkerELISAKit人肺癌標志物ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人小細胞肺癌細胞；NCI-H446費用Goat Anti-human IgG/Cy5.5  Cy5.5標記的羊抗人IgG   規(guī)格 0.1ml*

Goat Anti-human IgG/Cy5  Cy5標記的羊抗人IgG   規(guī)格 0.1ml*

Goat Anti-human IgG/Cy3  Cy3標記的羊抗人IgG   規(guī)格 0.1ml*

Goat Anti-human IgG/Bio  標記的羊抗人IgG   規(guī)格 0.1ml*

Goat Anti-human IgG/APC  APC標記的羊抗人IgG   規(guī)格 0.1ml*

Goat Anti-human IgG/AP  堿性磷酸酶（AP）標記的羊抗人IgG   規(guī)格 0.1ml*

Goat Anti-human IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標記的羊抗人IgG   規(guī)格 0.1ml*

Goat Anti-human IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標記的羊抗人IgG   規(guī)格 0.1ml*

Goat Anti-human IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標記的羊抗人IgG   規(guī)格 0.1ml*

Goat Anti-human IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標記的羊抗人IgG   規(guī)格 0.1ml*

Goat anti-human IgG whole serum  羊抗人IgG抗血清   規(guī)格 1ml*

Goat Anti-human IgG  羊抗人IgG   規(guī)格 1mg*

人小細胞肺癌細胞；NCI-H446費用在運輸?shù)倪^程中，細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，因此客戶在收到貨以后的*時間是要先觀察產(chǎn)品的狀況，顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時，請不要立即打開培養(yǎng)瓶，應立即將培養(yǎng)瓶置于細胞培養(yǎng)箱過夜，并于次日在顯微鏡下觀察，此時多數(shù)細胞會重新貼附于瓶壁。如果發(fā)現(xiàn)細胞仍不能貼壁，請試著用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理；如若證實細胞無活力，請在收到貨后48小時內(nèi)將細胞狀態(tài)反饋給我公司，我們將盡快幫助解決。