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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2021-11-12 09:45:31瀏覽次數(shù):667次
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本公司代理ATCC細(xì)胞,提供小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;STO費(fèi)用售前售后一條龍服務(wù),若要獲取詳細(xì)的說明書或價(jià)格信息,點(diǎn)擊了解更多小鼠源細(xì)胞。
細(xì)胞名稱 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;STO費(fèi)用
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 STO是一株繼代生長的胚成纖維細(xì)胞系,可用于制備飼養(yǎng)層細(xì)胞(feeder layers)和其他研究。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C4
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;STO費(fèi)用在運(yùn)輸?shù)倪^程中,細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來,因此客戶在收到貨以后的*時(shí)間是要先觀察產(chǎn)品的狀況,顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí),請不要立即打開培養(yǎng)瓶,應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱過夜,并于次日在顯微鏡下觀察,此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞仍不能貼壁,請?jiān)囍门_盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,如臺盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請按懸浮細(xì)胞的方法處理;如若證實(shí)細(xì)胞無活力,請?jiān)谑盏截浐?8小時(shí)內(nèi)將細(xì)胞狀態(tài)反饋給我公司,我們將盡快幫助解決。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;STO費(fèi)用培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
注意事項(xiàng):
1.收到小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;STO費(fèi)用后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)絡(luò)。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時(shí)間證明,期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
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質(zhì)量規(guī)格:比活度:>20U/mg,BCN-HydroxysuccinimideN-羥基丁二酰亞胺(>98%,BR)
質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRN-HydroxyRiluzoleN-羥基*
質(zhì)量規(guī)格:比活度:>5000U/mg,BCN-HydroxyNorfloxacinN-羥基*
質(zhì)量規(guī)格:>98%,植物激素級N-GlycolylneuraminicAcidN-羥乙酰神經(jīng)氨酸
質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,BRN-DesbutylBupivacaineN-去丁基*
質(zhì)量規(guī)格:>97%,BiotechGradeN-DesmethylAzelastineN-去甲氮卓斯汀
質(zhì)量規(guī)格:酶活:>50U/mg,進(jìn)分N-Desmethyl-4'-hydroxyTamoxifenN-去甲基-4'-羥基它莫西芬
質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級N-Desmethyl-4-hydroxyTamoxifen(approx.1:1E/ZMixture)N-去甲基-4-羥基它莫西芬(大約1:1E/Z混合物)
pGL4.30[Luc2P/NFAT-RE/Hygro]PotassiumFerrocyanideTrihydrate20次
pGL4.37[luc2P/ARE/Hygro]PotassiumHydrogenPosphate20次
pGLucbasicPotassiumPhosphateSolution,0.2M,pH7.020次
pGluePotassiumPhosphateSolution,0.2M,pH7.220次
pGNPotassiumPhosphateSolution,0.2M,pH7.4.20次
pGreen0029PotassiumPhosphateSolution,0.2M,pH7.520次
pGRE-LucPotassiumPhosphateSolution,0.2M,pH7.620次
pGreenPuro(CMV)PotassiumPhosphateSolution,0.2M,pH8.020次
pGRN145PotassiumPhosphateSolution,0.5M,pH7.020次
pGro7PotassiumPhosphateSolution,0.5M,pH7.220次
pGTf2PotassiumPhosphateSolution,0.5M,pH7.420次
pGZPotassiumPhosphateSolution,0.5M,pH7.520次
pHagcmv2PotassiumPhosphateSolution,0.5M,pH7.620次
pHANNIBALPotassiumPhosphateSolution,0.5M,pH8.020次
pG-Tf2pOTB7FKBP420次
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;STO費(fèi)用CACNB2 L-型電壓依賴型鈣通道β多克隆抗體 0.1ml
Cactin/C19orf29 19號染色體開放閱讀框29多克隆抗體 0.2ml
Cadherin 10 鈣粘附分子10多克隆抗體 0.2ml
Cadherin 8 鈣粘附蛋白8多克隆抗體 0.2ml
Cadherin 8 鈣粘附蛋白8多克隆抗體 0.2ml
Cadherin 9 鈣粘附蛋白9多克隆抗體 0.2ml
Cadherin like 23 鈣粘蛋白23多克隆抗體 0.2ml
CADM 4 細(xì)胞粘附分子4多克隆抗體 0.2ml
CADM2/IGSF4D/Cell adhesion molecule 2 細(xì)胞粘附分子2 0.2ml
CADM3/IGSF4B 細(xì)胞粘附分子3多克隆抗體 0.2ml
CAGE1/CT3/CT95 腫瘤/抗原3多克隆抗體 0.2ml
CaIPLA2/PLA2G6 胞漿鈣獨(dú)立磷脂酶A2多克隆抗體 0.1ml
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