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小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1保存

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更新時(shí)間:2019-02-19 11:34:34瀏覽次數(shù):673次

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了解更多小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1保存,相關(guān)資料如:說明書、培養(yǎng)條件、注意事項(xiàng)及售后可咨詢我們?cè)诰€客服。收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含10% FBS的新鮮培養(yǎng)基,不建議使用原瓶中運(yùn)輸用培養(yǎng)基。


本公司代理ATCC細(xì)胞,提供小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1保存售前售后一條龍服務(wù),若要獲取詳細(xì)的說明書或價(jià)格信息,點(diǎn)擊了解更多小鼠源細(xì)胞
細(xì)胞名稱  小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1保存
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣

生長特性 貼壁生長

特征特性 3T3-L1是從3T3細(xì)胞(Swiss albino)中經(jīng)克隆分離得到的連續(xù)傳代的亞系。該細(xì)胞從快速分裂到匯合和接觸性抑制狀態(tài)經(jīng)歷了前脂肪細(xì)胞到脂肪樣細(xì)胞的轉(zhuǎn)變。該細(xì)胞鼠痘病毒陰性;可產(chǎn)生甘油三酯,高濃度血清可增強(qiáng)細(xì)胞內(nèi)脂肪堆積。

培養(yǎng)條件 DMEM-H:

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS  

傳代方法 1:

3傳代;3-4天一次  

傳代情況

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1保存在運(yùn)輸?shù)倪^程中,細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來,因此客戶在收到貨以后的*時(shí)間是要先觀察產(chǎn)品的狀況,顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí),請(qǐng)不要立即打開培養(yǎng)瓶,應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱過夜,并于次日在顯微鏡下觀察,此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞仍不能貼壁,請(qǐng)?jiān)囍门_(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,如臺(tái)盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請(qǐng)按懸浮細(xì)胞的方法處理;如若證實(shí)細(xì)胞無活力,請(qǐng)?jiān)谑盏截浐?8小時(shí)內(nèi)將細(xì)胞狀態(tài)反饋給我公司,我們將盡快幫助解決。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1保存培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號(hào)16000-044),15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
注意事項(xiàng):
1.收到小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1保存后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們聯(lián)絡(luò)。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時(shí)間證明,期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
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質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Diosgeninglucoside延齡草苷(標(biāo)準(zhǔn)品)

質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Bergenin

質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Bergenin(標(biāo)準(zhǔn)品)

質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口JolkinolideB巖大戟內(nèi)酯B(標(biāo)準(zhǔn)品)

質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Petroselinicacid巖芹酸(標(biāo)準(zhǔn)品)

質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Fucoxanthin巖藻黃質(zhì);褐藻素

質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口L-(-)-Fucose巖藻糖;L-巖藻糖

質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Salinomycin鹽霉素,沙利霉素

丙胺雜質(zhì)ACAS訂購|咨詢規(guī)格:100mg

恩卡韋CAS訂購|咨詢規(guī)格:100mg

洋地黃CAS訂購|咨詢規(guī)格:約2.5g

派可林酸CAS535-75-1訂購|咨詢規(guī)格:20mg

烏梅CAS訂購|咨詢規(guī)格:2g

CAS訂購|咨詢規(guī)格:250mg

野菊花CAS訂購|咨詢規(guī)格:1g

枳實(shí)(酸橙)CAS訂購|咨詢規(guī)格:1g

草素CAS73-03-0訂購|咨詢規(guī)格:20mg

二羥丙CAS479-18-5訂購|咨詢規(guī)格:100mg

CAS3569-99-1訂購|咨詢規(guī)格:100mg
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1保存Vimentin  波形蛋白多克隆抗體     0.1ml

Vinculin  粘著斑蛋白多克隆抗體     0.1ml

VIP  血管活性腸肽多克隆抗體     0.1ml

VIP Receptor 1/VAPC1  血管活性腸肽受體-1多克隆抗體     0.1ml

VIP receptor 2/VPAC2  腺苷酸環(huán)化酶激活肽受體-II/血管活性腸肽受體-II多克隆抗體     0.1ml

Viperin/RSAD2  病毒抑制蛋白Viperin多克隆抗體     0.2ml

Visfatin-1(CT)  內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(C端多克隆抗體)     0.1ml

Vitamin D Binding protein  結(jié)合蛋白多克隆抗體     0.2ml

Vitamin D Receptor/VDR  3受體多克隆抗體     0.2ml

VLDL Receptor  極低密度脂蛋白受體多克隆抗體     0.1ml

VMAT1/VAT1  嗜鉻顆粒胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白VAT1多克隆抗體     0.1ml

VMAT2  腦單胺類神經(jīng)遞質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白多克隆抗體     0.2ml

 

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