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上海一研生物科技有限公司
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大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞;IEC-6保存

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品       牌

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2019-02-22 16:44:59瀏覽次數(shù):801次

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購(gòu)買(mǎi)客戶(hù)請(qǐng)先與我司細(xì)胞銷(xiāo)售人員核實(shí)訂購(gòu)的細(xì)胞名稱(chēng)、種屬、貨號(hào)、數(shù)量、細(xì)胞價(jià)格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷(xiāo)售人員索取大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞;IEC-6保存并認(rèn)真閱讀以方便你的實(shí)驗(yàn)操作。


本公司代理ATCC細(xì)胞,提供大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞;IEC-6保存售前售后一條龍服務(wù),若要獲取詳細(xì)的說(shuō)明書(shū)或價(jià)格信息,點(diǎn)擊了解更多大鼠源細(xì)胞。
細(xì)胞名稱(chēng)  大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞;IEC-6保存
形態(tài)特性 上皮樣

生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)

特征特性 可抑制該細(xì)胞的生長(zhǎng)。該細(xì)胞表達(dá)腸上皮*抗原,在20代以前保持恒定的生長(zhǎng)速度和細(xì)胞形態(tài),此后生長(zhǎng)速度迅速下降,細(xì)胞形態(tài)也發(fā)生改變。

培養(yǎng)條件 DMEM-H:

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 5%FBS;0.01mg/ml Insulin  

傳代方法 1:3~1:6傳代;每周換液2次。

傳代情況 P24

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS


大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞;IEC-6保存在運(yùn)輸?shù)倪^(guò)程中,細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來(lái),因此客戶(hù)在收到貨以后的*時(shí)間是要先觀察產(chǎn)品的狀況,顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí),請(qǐng)不要立即打開(kāi)培養(yǎng)瓶,應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱過(guò)夜,并于次日在顯微鏡下觀察,此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞仍不能貼壁,請(qǐng)?jiān)囍门_(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,如臺(tái)盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請(qǐng)按懸浮細(xì)胞的方法處理;如若證實(shí)細(xì)胞無(wú)活力,請(qǐng)?jiān)谑盏截浐?8小時(shí)內(nèi)將細(xì)胞狀態(tài)反饋給我公司,我們將盡快幫助解決。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞;IEC-6保存培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號(hào)16000-044),15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
注意事項(xiàng):
1.收到大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞;IEC-6保存后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們聯(lián)絡(luò)。
2.收到細(xì)胞先不開(kāi)瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷(xiāo)售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶(hù)收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶(hù)需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶(hù)提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問(wèn)題后客服人員溝通的時(shí)間證明,期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
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質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口1-Nonanol正壬醇(StandardforGC,≥99.5%(GC))

質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口n-Nonyl-beta-D-maltopyranoside正壬基-beta-D-麥牙糖苷(>98%,BC)

質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Nonane正壬烷(standardforGC,≥99.5%(GC))

質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Nonane正壬烷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.8%(GC))

質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口1-Phenyldodecane正十二烷基苯(analyticalstandard,≥99.5%(GC))

質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口N-NONADECANE正十九烷(標(biāo)準(zhǔn)品)

質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Hexadecane正十六烷(StandardforGC,>99.5%(GC))

質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Hexadecane正十六烷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC))

帕夏查耳;PashaneCAS42438-78-8訂購(gòu)|咨詢(xún)規(guī)格:10mg

芒果苷;MangiferinCAS4773-96-0訂購(gòu)|咨詢(xún)規(guī)格:20mg

辣椒素;CapsaicinCAS2444-46-4訂購(gòu)|咨詢(xún)規(guī)格:20mg

金剛烷;AdamantaneCAS281-23-2訂購(gòu)|咨詢(xún)規(guī)格:20mg

戈米辛J;GomisinJCAS66280-25-9訂購(gòu)|咨詢(xún)規(guī)格:10mg

二氫石蒜堿;DihydrolycorinCAS6271-21-2訂購(gòu)|咨詢(xún)規(guī)格:20mg

3-O-沒(méi)食子酰粘酸;3-O-galloCAS訂購(gòu)|咨詢(xún)規(guī)格:20mg

龍血素B;LoureirinBCAS119425-90-0訂購(gòu)|咨詢(xún)規(guī)格:20mg

枸櫞酸血根堿;SanguinarineCAS訂購(gòu)|咨詢(xún)規(guī)格:20mg

胡屬苷;SesamosideCAS117479-87-5訂購(gòu)|咨詢(xún)規(guī)格:20mg

藁本內(nèi)酯;LigustilideCAS4431-01-0訂購(gòu)|咨詢(xún)規(guī)格:50mg
大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞;IEC-6保存3%SodiumChloridePeptoneWater9ml*20支/包3%氯化鈉堿性蛋白胨水

3%NaClAlkalinePeptoneWater225ml/袋*103%氯化鈉堿性蛋白胨水顆粒

3%NaClTrypticSoyAgar250g3%氯化鈉胰蛋白胨大豆瓊脂

3%NaClMR-VPMedium20支3%氯化鈉MR-VP培養(yǎng)基

3%NaClAlkalinePeptoneWater10個(gè)/包含225ml3%氯化鈉堿性蛋白胨水均質(zhì)袋

2216ELiquidMedium250g2216E液體培養(yǎng)基

2216EAgar250g2216E瓊脂

 

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