產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷
商品屬性：

產(chǎn)品英文名稱：Human TGF-β protein，His tag

產(chǎn)品中文名稱：重組人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β，His-標(biāo)簽TGF-β

規(guī)格：5 μg/20 μg/100 μg/1 mg

貨號(hào)：EY-01X8682
用途：僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

特點(diǎn)&優(yōu)勢(shì):

標(biāo)簽C-His

表達(dá)宿主:大腸桿菌

種屬:人

序列:氨基酸序列來(lái)源于人源：TGF-β1（Met 278-Asn 390）(P01137)表達(dá)的蛋白片段，在 C 端用 6×His 標(biāo)記表達(dá)。

活性:通過(guò)其抑制il -4誘導(dǎo)HT-2細(xì)胞增殖的能力來(lái)測(cè)定。這種效應(yīng)的 ED?? <0.1 ng/mL。重組人 TGF beta 1 的特異性活性:約大于 5 x 10? IU/mg。以其誘導(dǎo) MCF-7 細(xì)胞增殖的能力來(lái)衡量。該效應(yīng)的 ED?? 值為 <3.2 ng/mL。

蛋白長(zhǎng)度：該蛋白質(zhì)的計(jì)算分子量為 13.7動(dòng)?動(dòng)

背景

轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子 beta（TGF beta）家族的細(xì)胞因子無(wú)處不在，具有多種功能，對(duì)生存至關(guān)重要。它們?cè)谏L(zhǎng)、發(fā)育、炎癥、修復(fù)和宿主免疫中發(fā)揮著核心作用。哺乳動(dòng)物的 TGF beta 異構(gòu)體（TGF beta 1、beta 2 和 beta 3）作為潛在的前體分泌，擁有多種細(xì)胞表面受體，并產(chǎn)生至少兩種介導(dǎo)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的受體。

本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):

 1.操作簡(jiǎn)便、快捷?？芍苯蛹尤氲綑z測(cè)平板。在96-孔板中檢測(cè)時(shí),無(wú)需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。

2. 無(wú)放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來(lái)溶解甲臜產(chǎn)物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。
公司正在出售的產(chǎn)品：

BKCa channels(calcium-activated potassium channel 0.5mgBKCa channels(calcium-activated potassium channel) 鈣激活通道蛋白

CXCL1 Protein Human 重組人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & NusA 標(biāo)簽)

RBP4重組小鼠 RBP4 蛋白 Protein

CLEC14A Protein Rat 重組大鼠 CLEC14A / EGFR-5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

VDR重組人 VDR / NR1I1 蛋白 Protein

小鼠酶(CAT)ELISA 試劑盒  試劑盒 組裝/原裝

Rat immunoglobulin E (IgE) ELISA Kit 大鼠免疫球蛋白E(IgE)檢測(cè)試劑盒

humanNoradrenaline,NAELISAKit 人去甲(NA)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanAi-phosphatidylserineaibody,APSA檢測(cè)試劑盒人抗0脂酰絲抗體(APSA)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物細(xì)胞可溶性總核蛋白粗提制備試劑盒20次

HumaypeⅡcollagenhelicalpeptide，HELIX-ⅡELISAKit人Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠巨噬細(xì)胞游走抑制因子   英文名稱：   macrophage migration inhibitory factor   規(guī)格：      英文縮寫：   MIF

小鼠巨噬細(xì)胞性蛋白-1   英文名稱：   Macrophage Inflammatory protein 1   規(guī)格：      英文縮寫：   MIP-1

小鼠巨噬細(xì)胞性蛋白-2   英文名稱：   Macrophage Inflammatory protein 2   規(guī)格：      英文縮寫：   MIP-2

小鼠巨噬細(xì)胞性蛋動(dòng)?動(dòng)

大鼠凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1(LOX1)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： LOX1 ELISA Kit

Mouse platelet membrane glycoprotein B II (GP- II III a B III a/CD41+CD6 小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD6

RatPhosphotylinosital3kinase,PI3KELISAKit 大鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforGHELISAKit大鼠釋放激素

細(xì)胞酶3(PON3)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒

Ratthioredoxieductase,xRELISAKit大鼠硫氧還蛋白還原酶(xR)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

重組人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β，His-標(biāo)簽TGF-βRBP4重組小鼠 RBP4 蛋白 Protein

BKCa channels(calcium-activated potassium channel 0.5mgBKCa channels(calcium-activated potassium channel) 鈣激活通道蛋白

VDR重組人 VDR / NR1I1 蛋白 Protein

CXCL1 Protein Human 重組人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & NusA 標(biāo)簽)

CLEC14A Protein Rat 重組大鼠 CLEC14A / EGFR-5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

操作步驟：

(一)獲得目的基因

1、通過(guò)PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

2、通過(guò)RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體

1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點(diǎn))進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種

1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測(cè)序驗(yàn)證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點(diǎn)。

3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。

(四)誘導(dǎo)表達(dá)

1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過(guò)夜培養(yǎng)。

2、按1∶50比例稀釋過(guò)夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對(duì)照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實(shí)驗(yàn)組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。