細(xì)胞處理：

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實驗使用。

小鼠乳腺癌細(xì)胞;4T1-LUC-EGFP

商品屬性

商品介紹

細(xì)胞別稱；4T1-LUC-EGFP；小鼠乳腺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記-綠色熒光蛋白；4T1-熒光素酶標(biāo)記-綠色熒光蛋白

種屬來源；小鼠

組織來源；乳房

生長特性；貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞代數(shù)；10代以內(nèi)

背景簡介；Luciferase 4T1細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)螢火蟲熒光素酶。該細(xì)胞株性狀穩(wěn)定，培養(yǎng)時不需要添加抗生素維持?？捎米魑灮鹣x熒光素酶活性檢測中的陽性對照，也可用于活體動物成像實驗。4T1細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶Luc基因。4T1細(xì)胞是從410.4瘤株中未經(jīng)誘變篩得的6-硫鳥嘌噙抗性細(xì)胞株。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時，進(jìn)行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。

（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。

（9）細(xì)胞凍存

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠P27蛋白(P27)檢測試劑盒 ，英文名： P27 ELISA Kit

Mouse dopamine (DA) ELISA Kit 小鼠多巴胺(DA)檢測試劑盒

ELISA 小鼠Toll樣受體-2(mouse TLR-2)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforIfi205(Humanierferonactivatedgene205)ELISAKit人干擾素活化基因205

通用型人體腺病毒(adenovirus)定性檢測試劑盒20次

ELISAKitHABP大鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白

LAMP1重組大鼠 LAMP1 / CD107a 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

glycoprotein (E1 glycoprotein 0.5mgglycoprotein (E1 glycoprotein) [Rubella virus] 風(fēng)疹病毒糖蛋白多肽片段

DAPK1重組人 DAPK1 / DAP Kinase 1 蛋白 (aa 1-363, His & GST 標(biāo)簽) Protein

FKBP7 Protein Human 重組人 PPIase / FKBP7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

SERPINA6 Protein Mouse 重組小鼠 SerpinA6 / CBG 蛋白

glycoprotein (E1 glycoprotein 0.5mgglycoprotein (E1 glycoprotein) [Rubella virus] 風(fēng)疹病毒糖蛋白多肽片段

FKBP7 Protein Human 重組人 PPIase / FKBP7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

LAMP1重組大鼠 LAMP1 / CD107a 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

SERPINA6 Protein Mouse 重組小鼠 SerpinA6 / CBG 蛋白

DAPK1重組人 DAPK1 / DAP Kinase 1 蛋白 (aa 1-363, His & GST 標(biāo)簽) Protein

小鼠乳腺癌細(xì)胞;4T1-LUC-EGFP小鼠催乳素(PRL)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human carbonic anhydrase (CA) ELISA Kit 人酶(CA)檢測試劑盒

HumanComplemefragme3a,C3aELISAKit 人補體片斷3a(C3a)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanbasicfibroblastgrowthfactor4,bFGF-4檢測試劑盒人堿性成纖維細(xì)胞生長因子4(bFGF-4)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物脂質(zhì)比色法定量檢測試劑盒20次

Humaestoterone，TELISAKit人睪同(T)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

豚鼠生長激素檢測試劑盒   豚鼠生長激素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豚鼠生長激素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠生長激素試劑盒、豚鼠生長激素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

豚鼠內(nèi)皮型合成酶檢測試劑盒   豚鼠內(nèi)皮型合成酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豚鼠內(nèi)皮型合成酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠內(nèi)皮型合成酶試劑盒、豚鼠內(nèi)皮型合成酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

豚鼠內(nèi)皮素1檢測試劑盒   豚鼠內(nèi)皮素1試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豚鼠內(nèi)皮素1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠內(nèi)皮素1試劑盒、豚鼠內(nèi)皮素1eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠17羥孕檢測試劑盒   小鼠17羥孕試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠17羥孕試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠17羥孕試劑盒、小鼠17羥孕eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。