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產(chǎn)品名稱 | 小鼠腦膜組織提取物培養(yǎng) |
英文名稱 | Brain: Normal Mouse Meningeal Derivatives |
價格 | 來電可享受優(yōu)惠 |
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產(chǎn)品描述:
小鼠腦膜組織提取物【Brain: Normal Mouse Meningeal Derivatives】
小鼠腦膜組織提取物培養(yǎng)腦膜組織由外向內由硬網(wǎng)膜、蛛網(wǎng)膜和軟腦膜組成。公司科技提供來自新鮮或冷凍小鼠腦膜組織中高質量的總RNA,PCR準備的*條cDNA鏈,蛋白質及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。
總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA*鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及0mg總RNA。68℃反應0min 后終止RT反應。利用x RT Buffer 運輸cDNA, μl cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析,保證產(chǎn)品的質量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 50mM NaCl, mM EDTA, mM EGTA, % NP-40 , mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人血管組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, % SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 潛在的應用: <>已知基因的PCR克??;<2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標測序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測與蛋白質組學;<6>芯片研究與表達圖譜。
技術傳授:
凍存培養(yǎng)基
小鼠腦膜組織提取物培養(yǎng)凍存細胞時必須使用的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含0% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用 Countess®自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約00-200×g的離心力將細胞懸液離心5至0分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低 °C?;蛘?,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
以下是小鼠腦膜組織提取物培養(yǎng)的相關產(chǎn)品:
兔抗CXorf36多克隆抗體 英文名:Anti-CXorf36 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗CYP46A多克隆抗體 英文名:Anti-CYP46A rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗CYP26多克隆抗體 英文名:Anti-CYP26 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗PTGIS多克隆抗體 英文名:Anti-PTGIS rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗CSTB多克隆抗體 英文名:Anti-CSTB rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗MT-CYB多克隆抗體 英文名:Anti-MT-CYB rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗AAM多克隆抗體 英文名:Anti-AAM rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗AB2IP多克隆抗體 英文名:Anti-AB2IP rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗AP多克隆抗體 英文名:Anti-AP rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗RHOBTB2多克隆抗體 英文名:Anti-RHOBTB2 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗AH2多克隆抗體 英文名:Anti-AH2 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗X4多克隆抗體 英文名:Anti-X4 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
小鼠腦膜組織提取物培養(yǎng)Topotecan hydrochloride 鹽酸拓撲替康 943-54-6 20mg
鈣熒光探針Fura-2, AM mg 支
Pyruvic acid 丙酮酸 25g 瓶
Urea 尿素 500g 瓶
Arecoline hydrobromide 氫溴檳榔堿 300-08-3 50mg
30ml親和層析柱 (2.3×0) 30ml 個
中性樹膠 (切片標本永保藏封片劑) 00ml 瓶
Pregnenolone 孕甾烯醇酮 45-3- 20mg
Trizol 00ml 瓶
反轉錄酶 M-MLV 0000u 支
0.5mlPCR管,0盒/箱 000支 盒
細胞可重發(fā)跟不可重發(fā):
可以重發(fā)的情況有哪些?
()細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細胞復蘇后,絕大多數(shù)細胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細胞靜置24小時后,絕大多數(shù)細胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細胞復蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
小鼠腦膜組織提取物培養(yǎng)出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
()客戶造成細胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細胞狀態(tài)不好,未細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細胞收到2天內,未告知,不重發(fā);
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