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Elisa試劑盒產(chǎn)品參數(shù)

一、產(chǎn)品參數(shù)

通用名：小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒

二、包裝規(guī)格  96T×1/盒、96T×2/盒 

三、預(yù)期用途  本試劑盒用于檢測豬血清中豬口蹄疫病毒3ABC抗體，用于區(qū)別口蹄疫野毒感染豬和用滅活疫苗免疫豬。 

四、試劑盒原理 

用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗C3抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗C3抗體、HRP標(biāo)記的親和素，經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的C3呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)，計(jì)算樣品濃度。

五、小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒組成 

酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物、樣品稀釋液、濃縮洗滌液、底物液A、底物液B、陽性對照、陰性對照 

六、儲存及有效期 

于2～8℃避光保存，有效期為12個(gè)月。 

包被板開封后請于2～8℃避光保存，避免受潮。使用期限為2個(gè)月。 

七、適用儀器  含450nm、630nm波長的酶標(biāo)儀，37℃恒溫設(shè)備，可調(diào)微量移液器。 

Elisa試劑盒操作步驟

小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒操作步驟 

一、樣品準(zhǔn)備 

1.取動(dòng)物全血按常規(guī)方法制備血清，要求血清清亮，無溶血、無污染。樣品1周內(nèi)可于2～8℃保存，長期需置-20℃保存。 

2.用樣品稀釋液將待檢血清按100倍稀釋（如2μl血清加入198μl樣品稀釋液中，混勻）。陰、陽性對照不用稀釋。 

3.濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。 

二、檢驗(yàn)方法 

1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復(fù)至室溫。 

2.取所需用量酶標(biāo)板條，設(shè)空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存。 

3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl；陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl；樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。 

4.混勻，置37℃反應(yīng)30分鐘。 

5.扣去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，重復(fù)洗滌5次，拍干。 

6.每孔加酶標(biāo)記物100μl（空白孔除外）。置37℃反應(yīng)30分鐘。 

7.洗滌，同步驟5。 

8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混勻，37℃避光反應(yīng)10分鐘。 

9.每孔加終止液50μl，混勻，用空白孔調(diào)零，于450nm(可用630nm作參比波長）測定各孔吸光值（A值）。 

小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒原理實(shí)驗(yàn)條件和技術(shù)要點(diǎn):

在應(yīng)用ELISA時(shí)，首先要清楚下面內(nèi)容：

1，是檢測抗體還是抗原？

2，檢測的結(jié)果是定性還是定量？

3，是否需要檢測特異抗體的類型？

4，所用抗體/單克隆抗體的親和力怎樣？

(1)檢測抗原  zui常用于檢測抗原的方法是非競爭性的雙抗體夾心法，其次是競爭法。但競爭法在具體實(shí)驗(yàn)中有些困難，特別是檢測微生物的抗原，因?yàn)樾枰獦?biāo)記抗原，這對于某些抗原是很難做到的，甚至是不可能的。另外在競爭法中，酶標(biāo)記的抗原與標(biāo)本直接混合在一起，許多標(biāo)本中含有酶抑制劑或蛋白A樣物質(zhì)，可影響ELISA的結(jié)果。

(2)檢測抗體  檢測抗體種類常用的方法是檢測抗體種類的捕獲法，這個(gè)方法常用于檢測特異性IgG、IgA和IgM.。這個(gè)方法的*步是捕獲所需要檢測的一個(gè)種類的抗體，接下來是檢測捕獲的抗體是否是特異性抗原的抗體。間接ELISA在檢測IgG時(shí)比較簡單，但不適用于檢測其他種類的抗體，因?yàn)檠逯腥绻刑禺怚gG存在將與IgM或IgA等競爭結(jié)合抗原。

Elisa試劑盒結(jié)果分析 

小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒結(jié)果分析 

一、 參考值 

實(shí)驗(yàn)正常的情況下，陰性對照≤0.15，陽性對照≥0.5。 

二、檢驗(yàn)結(jié)果的解釋 

樣品A值≥0.38為陽性；樣品A值在0.2到0.38之間為可疑；樣品A值＜0.2為陰性。