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一、“豬腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒”特點(diǎn)概述
1.專一性強(qiáng)。抗原與抗體的免疫反應(yīng)是專一反應(yīng),而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ),所檢測(cè)的對(duì)象是抗原(或抗體),使用的抗體除標(biāo)記了酶以外,與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無多大差別。
2.靈敏度高。由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶,因此,借助于酶與底物的顯色反應(yīng),顯示抗原與抗體的結(jié)合,大大提高了檢測(cè)的靈敏性,使檢測(cè)水平接近放射免疫測(cè)定法。
3.樣品易保存。經(jīng)過酶反應(yīng)顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定,因此有利于樣品的保存。
4.結(jié)果易觀察。對(duì)檢測(cè)結(jié)果即可用肉眼觀察,又可用顯微鏡觀察,也可以用分光光度計(jì)進(jìn)行比色測(cè)定,還可用顯微鏡觀察。這是因?yàn)槟承┟阜磻?yīng)產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變,從而引起被檢測(cè)物的顯示。
5.可以定量測(cè)定。溶液中的抗原物質(zhì),應(yīng)用酶免吸附技術(shù)進(jìn)行比色測(cè)定,依據(jù)光密度值的變化,可以定量。預(yù)計(jì)用細(xì)胞分光光度計(jì)可對(duì)組織內(nèi)的抗原進(jìn)行免疫酶技術(shù)的定量測(cè)定。
6.可以大規(guī)模測(cè)定樣品。如有成千上萬份樣品需要進(jìn)行檢測(cè),免疫酶技術(shù)都能在較短時(shí)間內(nèi)完成。
7.儀器和試劑簡(jiǎn)單。對(duì)免疫沒技術(shù)來說,不需要熒光顯微鏡,也不需要測(cè)定放射性的特殊儀器,所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑,普通實(shí)驗(yàn)室及生產(chǎn)應(yīng)用單位均易購(gòu)置
6、*,質(zhì)量保證,zui大限度的節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
二、“Elisa試劑盒”應(yīng)用領(lǐng)域
本公司產(chǎn)品試用與各研究單位、學(xué)??蒲袑?shí)驗(yàn)
三、“豬腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒”操作流程(具體請(qǐng)參照說明書)
① 加抗體包被 → 4℃過夜,洗滌三次、拋干
② 加待檢抗原 → 37℃ 30分鐘,洗滌三次、拋干
③ 加酶標(biāo)抗體 → 37℃ 30分鐘,洗滌三次、拋干
④ 加底物液 → 37℃ 15分鐘,加終止液
⑤ 用ELISA檢測(cè)儀測(cè)定OD值
四、常見問題
實(shí)驗(yàn)中zui可能出現(xiàn)問題
一、所有孔未顯色?
分析原因:
1、微孔加入抗體后,洗板不*,微孔中存在游離的抗體。
2、用錯(cuò)試劑。
3、在操作中忘記加酶或抗體。
解決辦法:
1、檢查洗板器械,比如洗板機(jī)管道是否堵塞、洗液是否用完。
2、在加樣前,要看清瓶簽。
3、嚴(yán)格按說明書操作步驟進(jìn)行實(shí)驗(yàn),確保每步都到位。
二、所有孔顯色偏低?
分析原因:
1、微孔加入抗體后,洗板不*,微孔中存在游離的抗體。
2、洗板不干凈。
3、抗體污染了酶結(jié)合物等其它試劑。
4、溫度沒達(dá)到要求。
5、每孔加入的試劑量低于說明書要求量。
解決辦法:
1、手工加蒸餾水洗板時(shí),要避免吸頭接觸微孔,常更換新的蒸餾水。
2、洗板時(shí)要確保每孔都注滿蒸餾水(約400ul),且至少洗板五次。
3、嚴(yán)格按說明書要求操作,每次取樣要更換吸頭。
4、控制孵育溫度在25℃。
5、加樣器吸頭安放牢固避免吸樣不足,加樣時(shí)務(wù)必將吸頭內(nèi)液體打盡。
五、儲(chǔ)存方式
試劑盒在4℃下存放不要凍結(jié),4℃保存,有效期六個(gè)月,客戶應(yīng)要求供應(yīng)商,提供批次試劑盒