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一、“豬脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒 "特點(diǎn)概述
1.專(zhuān)一性強(qiáng)。抗原與抗體的免疫反應(yīng)是專(zhuān)一反應(yīng),而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ),所檢測(cè)的對(duì)象是抗原(或抗體),使用的抗體除標(biāo)記了酶以外,與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無(wú)多大差別。
2.靈敏度高。由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶,因此,借助于酶與底物的顯色反應(yīng),顯示抗原與抗體的結(jié)合,大大提高了檢測(cè)的靈敏性,使檢測(cè)水平接近放射免疫測(cè)定法。
3.樣品易保存。經(jīng)過(guò)酶反應(yīng)顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定,因此有利于樣品的保存。
4.結(jié)果易觀察。對(duì)檢測(cè)結(jié)果即可用肉眼觀察,又可用顯微鏡觀察,也可以用分光光度計(jì)進(jìn)行比色測(cè)定,還可用顯微鏡觀察。這是因?yàn)槟承┟阜磻?yīng)產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變,從而引起被檢測(cè)物的顯示。
5.可以定量測(cè)定。溶液中的抗原物質(zhì),應(yīng)用酶免吸附技術(shù)進(jìn)行比色測(cè)定,依據(jù)光密度值的變化,可以定量。預(yù)計(jì)用細(xì)胞分光光度計(jì)可對(duì)組織內(nèi)的抗原進(jìn)行免疫酶技術(shù)的定量測(cè)定。
6.可以大規(guī)模測(cè)定樣品。如有成千上萬(wàn)份樣品需要進(jìn)行檢測(cè),免疫酶技術(shù)都能在較短時(shí)間內(nèi)完成。
7.儀器和試劑簡(jiǎn)單。對(duì)免疫沒(méi)技術(shù)來(lái)說(shuō),不需要熒光顯微鏡,也不需要測(cè)定放射性的特殊儀器,所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑,普通實(shí)驗(yàn)室及生產(chǎn)應(yīng)用單位均易購(gòu)置
6、*,質(zhì)量保證,zui大限度的節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
二、“Elisa試劑盒"應(yīng)用領(lǐng)域
本公司產(chǎn)品試用與各研究單位、學(xué)校科研實(shí)驗(yàn)
三、“豬脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒 "操作流程(具體請(qǐng)參照說(shuō)明書(shū))
一、操作因素對(duì)ELISA結(jié)果的影響
ELISA操作步驟復(fù)雜,操作不當(dāng)將引起較大的誤差。以下敘述各個(gè)步驟中的影響因素。
1.加樣
2.溫育
3.洗滌
4.顯色
5.比色
二、灰區(qū)的設(shè)置
通常情況下,ELISA定性實(shí)驗(yàn)以“陽(yáng)性"和“陰性"來(lái)報(bào)告結(jié)果,兩者間有一條分界線被稱為“陽(yáng)性判斷值"(cut-off value,CO值),這是定性免疫測(cè)定結(jié)果報(bào)告的依據(jù)。
三、標(biāo)本復(fù)查
ELISA手工檢測(cè)過(guò)程復(fù)雜,影響因素較多,即使室內(nèi)質(zhì)控在控,也可能因孔間差異而造成結(jié)果的差異,因此加大復(fù)查力度是保證結(jié)果準(zhǔn)確性的可靠方法,比如對(duì)HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等項(xiàng)目的可疑、弱陽(yáng)性標(biāo)本及少見(jiàn)模式的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行復(fù)查。
四、結(jié)果判斷
常用下列幾種方法表示結(jié)果:
1.定性測(cè)定
2.半定量測(cè)定 結(jié)果一般以滴度表示。
3.定量測(cè)定 即用已知量的標(biāo)準(zhǔn)品作一系列稀釋后進(jìn)行ELISA測(cè)定,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,結(jié)果以量或單位表示。在ELISA定量檢測(cè)中每一塊反應(yīng)板都必須繪制相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
四、“ "常見(jiàn)問(wèn)題
實(shí)驗(yàn)中zui可能出現(xiàn)問(wèn)題
一、所有孔未顯色?
分析原因:
1、微孔加入抗體后,洗板不*,微孔中存在游離的抗體。
2、用錯(cuò)試劑。
3、在操作中忘記加酶或抗體。
解決辦法:
1、檢查洗板器械,比如洗板機(jī)管道是否堵塞、洗液是否用完。
2、在加樣前,要看清瓶簽。
3、嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)操作步驟進(jìn)行實(shí)驗(yàn),確保每步都到位。
二、所有孔顯色偏低?
分析原因:
1、微孔加入抗體后,洗板不*,微孔中存在游離的抗體。
2、洗板不干凈。
3、抗體污染了酶結(jié)合物等其它試劑。
4、溫度沒(méi)達(dá)到要求。
5、每孔加入的試劑量低于說(shuō)明書(shū)要求量。
解決辦法:
1、手工加蒸餾水洗板時(shí),要避免吸頭接觸微孔,常更換新的蒸餾水。
2、洗板時(shí)要確保每孔都注滿蒸餾水(約400ul),且至少洗板五次。
3、嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)要求操作,每次取樣要更換吸頭。
4、控制孵育溫度在25℃。
5、加樣器吸頭安放牢固避免吸樣不足,加樣時(shí)務(wù)必將吸頭內(nèi)液體打盡。
五、“ "儲(chǔ)存方式
試劑盒在4℃下存放不要凍結(jié),4℃保存,有效期六個(gè)月,客戶應(yīng)要求供應(yīng)商,提供批次試劑盒