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1694次*酶聯(lián)免疫反應(yīng)測試盒使用說明書
一.簡介
檢測物質(zhì) | 檢測下限(ng/g) |
飼料 | 1.0 |
肌肉/肝臟/腎臟/魚類/蝦 | 1.0 |
牛奶 | 0.5 |
血清 | 0.5 |
尿液 | 0.5 |
蜂蜜 | 2.0 |
藥物 | 交叉反應(yīng)% |
*(Enrofloxacin) | 100 |
*(Ciprofloxacin) | 100 |
達(dá)氟沙星(Danofloxacin) | 52 |
*(Norfloxacin) | 10 |
*(Enoxacin) | 9 |
*(Pipemidic acid) | 9 |
*(Ofloxacin) | 8 |
培諾沙星(Benofloxacin) | 7 |
氟甲喹(Flumequin) | 6 |
惡喹酸(Oxolin acid) | 5 |
*(Nalidixic acid) | 3 |
試劑 | 每個反應(yīng)需要的體積 | 24次反應(yīng)的體積 |
一抗 | 100 mL | 2.4mL |
二抗工作液 | 150 mL | 3.6 mL |
工作洗液 | 2 mL | 48 mL |
終止液 | 100 mL | 2.4 mL |
底物 | 100 mL | 2.4 mL |
可能原因 | 解決方法 |
試劑使用順序混亂,或者操作步驟出錯。 | 遵循實(shí)驗(yàn)說明重復(fù)實(shí)驗(yàn)。 |
使用了錯誤的抗體,或者二抗配制錯誤、失效。 | 確保抗體來自同一試劑盒,所有抗體不同批次之間有一定的差異,確保二抗的配制無誤。 |
TMB底物失效。 | 使用新的BIOO TMB底物。 |
可能原因 | 解決方法 |
試劑過期,或者不同的批次混用。 | 查證過期試劑和批次。 |
洗液配制錯誤。 | 使用試劑盒提供的洗液,正確配制。 |
過多次洗滌。 | 按照說明書要求進(jìn)行洗滌。 |
孵育時間過短。 | 按照說明書要求,嚴(yán)格計算好時間。 |
實(shí)驗(yàn)室溫度過低。 | 保持實(shí)驗(yàn)室溫度在20-25℃,不要在空調(diào)風(fēng)口或者寒冷的窗戶旁進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。 |
試劑或者微孔板溫度過低。 | 確保試劑或者微孔板*回溫,在實(shí)驗(yàn)開始前,將試劑放置盒子外zui少1小時。 |
使用錯誤波長讀數(shù),或者酶標(biāo)儀失靈。 | 確保450nm波長讀數(shù),檢查酶標(biāo)儀。 |
試劑盒處于的條件。 | 檢查試劑盒從冰箱拿出使用的次數(shù),檢查試劑盒是否放置溫度(過冷或者過熱)時間太長。 |
可能原因 | 解決方法 |
使用了質(zhì)量差的水。 | 如果使用的水可疑,嘗試使用蒸餾水配制洗液。 |
底物失效。 | 確保加入微孔板前,底物是無色的。 |
洗滌不當(dāng)或者洗板機(jī)洗板效果不好。 | 采用說明書建議的洗滌次數(shù),每次每孔至少加入250μL洗液。檢查洗滌系統(tǒng),排除故障。 |
酶標(biāo)儀失靈。如果OD值讀數(shù)很高而顏色很淺,那個這是非??赡艿那闆r。 | 使用校正微孔板檢查酶標(biāo)儀,檢查光源。 |
實(shí)驗(yàn)室溫度過高。 | 保持實(shí)驗(yàn)室溫度20-25℃,避免在熱源或者陽光直射處實(shí)驗(yàn)。 |
試劑混淆,被污染或者配制不當(dāng)。 | 確保使用正確的試劑,準(zhǔn)確配制,避免污染。 |
可能原因 | 解決方法 |
加入標(biāo)準(zhǔn)品,試劑和樣品的時間不一致。 | 確保所有試劑可用,盡可能使用多道槍加樣,加標(biāo)準(zhǔn)品,試劑和樣品途中,不能中斷。 |
多道槍使用不當(dāng)。 | 校準(zhǔn)多道槍,檢查吸嘴是否套緊,確保吸液量一致。 |
洗滌系統(tǒng)出現(xiàn)故障。 | 檢查洗滌系統(tǒng),保持良好運(yùn)行。 |
可能原因 | 解決方法 |
板與板之間孵育時間相差太大。 | 獨(dú)立計時,確保一致的孵育時間。 |
板與板之間不一致的洗滌過程。 | 確保相同的洗滌次數(shù),保證洗滌系統(tǒng)正常運(yùn)作。 |
使用移液槍不當(dāng)。 | 檢查移液槍,確保吸取相同液量。 |
微孔板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品處于不同溫度。 | 確保微孔板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品充分回到室溫,如果試劑體積較大則需要回溫較長時間。不能用溫水浴回溫樣品。 |
不同批次的試劑混用,或者試劑盒過期。 | 注意試劑不要混用,不同的試劑盒可能顯示不同的OD值,但是相對吸光值是有很好的對比性的。通常0標(biāo)準(zhǔn)品的OD值小于0.6顯示試劑質(zhì)量下降。 |
可能原因 | 解決方法 |
標(biāo)準(zhǔn)品添加順序混亂,或者放置于錯誤位置。 | 按照說明要求重復(fù)實(shí)驗(yàn),保證標(biāo)準(zhǔn)品添加正確。 |
標(biāo)準(zhǔn)品被污染或者與其他標(biāo)準(zhǔn)品混淆了。 | 改用新的標(biāo)準(zhǔn)品,按照由低濃度到高濃度的順序添加標(biāo)準(zhǔn)品。 |
洗滌不一致或者洗滌系統(tǒng)失靈。 | 遵循一如既往的洗滌方式,檢查洗滌系統(tǒng)。 |
加入標(biāo)準(zhǔn)品和試劑的時間不一致。 | 確保一切就緒,由低濃度到高濃度添加標(biāo)準(zhǔn)品并保證不被打擾,使用多道槍移液。 |
多道槍使用不當(dāng)。 | 校準(zhǔn)多道槍,檢查吸嘴是否套緊,確保吸液量一致。 |
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