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制訂本規(guī)則,保證實驗室工作人員的健康安全、實驗設備安全衛(wèi)生以及防止對外界環(huán)境造成污染。
二、適用范圍
適用于微生物實驗室人員人身安全、衛(wèi)生健康安全管理及設備安全。
三、職責
實驗室工作人員必需嚴格遵守安全操作規(guī)程。
四、安全操作規(guī)程:
1.員工安全操作規(guī)程
1.1 實驗室入口處須貼上生物危險標志,注明危險因子、生物安全級別、負責人姓名和、進入實驗室的特殊要求及離開實驗室的程序。
1.2 禁止非工作人員進入實驗室。參觀實驗室等特殊情況須經(jīng)實驗室負責人批準后方可進入,做好衛(wèi)生防護,并在有關(guān)人員陪同下方可進入,同時注意做好環(huán)境維護及保密工作。
1.3 進行感染性實驗時,禁止他人進入實驗室,或必須經(jīng)實驗室負責人同意后方可進入。免疫耐受或正在使用免疫抑制劑的工作人員必須經(jīng)實驗室負責人同意方可在實驗室工作。
1.4 接觸微生物或含有微生物的物品后,脫掉手套后和離開實驗室前要洗手。
1.5 禁止在工作區(qū)飲食、吸煙、處理隱形眼鏡、化妝及儲存食物。
1.6 盡量以移液器吸取液體,禁止口吸。
1.7 實驗過程中,嚴格按有關(guān)操作規(guī)程操作,降低濺出和氣溶膠的產(chǎn)生。
1.8 每天至少消毒一次工作臺面,活性物質(zhì)濺出后要隨時用75%乙醇或巴氏消毒液消毒。
1.9 工作人員應接受必要的免疫接種和檢測(如乙型肝炎疫苗、卡介苗等)。工作人員要接受有關(guān)的潛在危險知識的培訓,掌握預防暴露以及暴露后的處理程序。每年要接受一次的培訓。人員暴露于感染性物質(zhì)時,及時向?qū)嶒炇邑撠熑藚R報,并記錄事故經(jīng)過和處理方案。
1.10禁止將無關(guān)動物帶入實驗室。
2.無菌室安全操作規(guī)程
2.1無菌培養(yǎng)室每天都要用0.2%的新潔爾滅拖洗地面一次(拖布),紫外線照射消毒30min以上,超凈工作臺臺面每次實驗前要用75%酒精擦洗。然后紫外線消毒30min。操作用具如移液器、廢液缸、污物盒、試管架等用75%酒精擦洗后置于臺內(nèi)同時紫外線消毒。
2.2無菌室應保持清潔,嚴禁堆放雜物,以防污染。
2.3無菌室應備有工作濃度的消毒液,如5%的甲酚溶液,75%的酒精,0.1%的新潔爾滅溶液,等等。
2.4無菌室應定期用適宜的消毒液滅菌清潔,以保證無菌室的潔凈度符合要求。
2.5需要帶入無菌室使用的器械、平皿等一切物品,均應包扎嚴密,并應經(jīng)過適宜的方法滅菌。
2.6工作人員進入無菌室前,必須用肥皂或消毒液洗手消毒,然后在緩沖間更換工作服,鞋,帽子,口罩和手套(或用75% 乙醇等消毒劑再次擦拭雙手),方可進入無菌室進行操作。
2.7無菌室使用前必須打開無菌室的紫外燈輻照滅菌30分鐘,并且同時打開超凈臺進行吹風。操作完畢,應及時清理無菌室,再用紫外燈輻照滅菌30分鐘。
2.8供試品在檢查前,應保持外包裝完整,不得開啟,以防污染。檢查前,用75%的酒精棉球消毒外表面。
2.9每次操作過程中,均應做陰性對照,以檢查無菌操作的可靠性。
2.10吸取菌液時,必須用移液器吸取,切勿直接用口接觸吸管。
2.11接種針每次使用前后,必須通過火焰灼燒滅菌,待冷卻后,方可接種培養(yǎng)物。
2.12帶有菌液的吸管,試管,培養(yǎng)皿等器皿應浸泡在盛有5%來蘇爾溶液或巴氏消毒液的消毒桶內(nèi)消毒,24小時后取出沖洗。
2.13如有菌液灑在桌上或地上,應立即用5%石碳酸溶液或3%的來蘇爾傾覆在被污染處至少30分鐘,再做處理。工作衣帽等受到菌液污染時,應立即脫去,高壓蒸汽滅菌后洗滌。
2.14凡帶有活菌的物品,必須經(jīng)消毒后,才能在水下沖洗,嚴禁污染下水道。
2.15無菌室應每月檢查菌落數(shù)。在層流無菌風開啟的狀態(tài)下,取內(nèi)徑90mm的無菌營養(yǎng)瓊脂平板5個,分別放置無菌室四周及中央位置,開蓋暴露30分鐘后,倒置于36℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時,取出檢查。100級潔凈區(qū)平板雜菌數(shù)平均不得超過1個菌落/平皿,10000級潔凈室平均不得超過3個菌落/平皿。如超過限度,應用臭氧發(fā)生器等對無菌室進行*消毒,直至重復檢查合乎要求為止。
3.壓力蒸汽滅菌器的安全使用操作程序:
3.1堆放:將需滅菌的物品予以妥善包扎,各包之間留有空隙,依次堆放在滅菌桶的篩板上,以蒸汽穿透,提高滅菌效果。需滅菌物品外需黏上高壓指示膠帶以檢驗滅菌溫度是否達到要求。
3.2 加水:在鍋體內(nèi)注入生活用水,水位一定要超過電熱管2厘米以上(不宜過多);連續(xù)使用時,每次操作前,必須補足上述水位,以免燒壞電熱管和意外發(fā)生。
3.3 密封:在每次使用高壓鍋前,都必須認真檢查高壓鍋的出氣伐和安全閥,確保其狀態(tài)完好,如有故障,在故障排除之前不得使用高壓滅菌鍋。把堆放好物品的滅菌桶放在鍋體內(nèi),蓋上鍋蓋并鎖緊。
3.4 加熱滅菌:將滅菌器接通與銘牌一致的電源,按下電源開關(guān),接通電源,指示燈亮,表示電源已正常輸入本器,按下開始按紐電熱管開始加熱工作;滅菌期間工作人員需監(jiān)視高壓鍋指示面板上的壓力、溫度和時間等。
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