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上海永葉生物科技有限公司
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閱讀:359發(fā)布時間:2017-6-9
產(chǎn)品簡介:
革蘭氏染色法是丹麥醫(yī)生Christain Gram于1884年所發(fā)明,是細菌學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法,亦是一種復(fù)染法。未經(jīng)染色的細菌,由于其與周圍環(huán)境折光率差別甚小,故在顯微鏡下極難觀察。染色后細菌與環(huán)境形成鮮明對比,可以清楚地觀察到細菌的形態(tài)、排列及某些結(jié)構(gòu)特征,用以分類鑒定。通過此法染色可將細菌鑒別為革蘭陽性菌(G+)和革蘭陰性菌(G-)兩大類。細菌的不同顯色反應(yīng)是由于細胞壁對乙醇的通透性和抗脫色能力的差異,主要是肽聚糖層厚度和結(jié)構(gòu)決定的。經(jīng)結(jié)晶紫染色的細胞用碘液處理后形成不溶性復(fù)合物,乙醇能使它脫色。
Gram-Twort*采用非經(jīng)典的革蘭染色配方, 用到紅色和綠色染料,使色彩較為豐富,背景干凈,胞核胞質(zhì)對比強烈,細菌染色特征典型,多用于組織切片的染色。
產(chǎn)品組成:
編號 名稱 | R23108-4*100ml | Storage |
試劑(A): 結(jié)晶紫染色液 | 100ml | RT 避光 |
試劑(B): Gram碘液 | 100ml | RT 避光 |
試劑(C): Twort分化液 | 250ml | RT |
試劑(D): Twort染色液 | 100ml | RT 避光 |
使用說明書 | 1份 |
自備材料:
1、 載玻片
2、 恒溫箱或水浴鍋
3、 光學(xué)顯微鏡
操作步驟(僅供參考):
1、 組織切片梯度酒精脫蠟,蒸餾水中水化。
2、 入結(jié)晶紫染色液染色3~4min。
3、 清水緩慢沖洗去染色液。
4、 入Gram碘液,浸染3min。
5、 自來水沖洗,吸干水分,置于高溫處干燥。
6、 將切片置于提前56℃預(yù)熱的Twort分化液中分化,直至不再有顏色脫出為止。該過程一般需要15-25min,玻片應(yīng)該呈現(xiàn)淺褐色或草黃色。
7、 蒸餾水沖洗。
8、 入Twort染色液,浸染5min。
9、 蒸餾水沖洗。
10、將切片置于Twort分化液中分化,直至不再有紅色脫出為止。該過程一般需要數(shù)秒。
11、直接用無水乙醇脫水,二甲苯透明,中性樹膠封固。
染色結(jié)果:
革蘭氏陽性菌 | 藍黑色 |
革蘭氏陰性菌 | 粉紅色 |
細胞核 | 紅色 |
紅細胞以及大部分細胞漿 | 綠色 |
彈性纖維 | 黑色 |
注意事項:
1、 革蘭染色的關(guān)鍵在于嚴格掌握脫色程度,脫色時間應(yīng)根據(jù)經(jīng)驗判斷。脫色過度,陽性菌可被誤染為陰性菌;脫色不夠,陰性菌可被誤染為陽性菌。
2、 待檢細菌培養(yǎng)時間會影響染色,陽性菌培養(yǎng)時間過長或已死亡或細菌溶解,常呈陰性。
3、 由于該染色過程復(fù)雜,未必能夠顯示出所有色彩。
4、 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期: 12個月有效。
商鋪:http://www.yixinui.com/st43046/
主營產(chǎn)品:生化試劑,ELISA試劑盒,標準品,透析袋,培養(yǎng)基,實驗耗材,進口試劑,amresco,sigma
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