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三氯化鋁沉淀法濃縮水體中的病毒
近年來, 水源性病毒疾病的爆發(fā)在世界范圍內(nèi)被大量報道, 大量研究證實(shí)[1], 外環(huán)境水體及淤泥是病毒存活循環(huán)的主要場所, 并因此頻頻引發(fā)傳染病的流行。但在生活環(huán)境的各種水體中, 除生活污水外, 其所含有的病毒濃度往往很低, 以目前現(xiàn)有的檢測方法, 仍然達(dá)不到不經(jīng)濃縮而直接從水中檢測病毒的目的。同時, 食源性病毒的感染劑量非常低, 10?100個病毒粒子即可引發(fā)感染。病毒在離體條件下存活力很強(qiáng), 對各種理化因子有較強(qiáng)的抵抗力, 耐乙醚和弱酸, 用氯仿、反復(fù)凍融、超聲波處理都不能使其失活。因此, 水環(huán)境中微量存在的病毒仍然對人類的健康帶來很大的威脅。
在我國, 雖然已經(jīng)建立起了以PCR為主導(dǎo)的病毒快速檢測方法, 但是對于水樣本的前處理技術(shù)至今沒有找到十分理想的病毒濃縮方法, 無法有效去除樣本中的抑制物, 這些因素都嚴(yán)重制約了針對水中食源性病毒的檢測和預(yù)防。要掌握各種水體中病毒污染的基本狀況, 樣品中病毒的濃縮是能否得以成功檢測的關(guān)鍵。另外, 目前世界上絕大多數(shù)國家所執(zhí)行的標(biāo)準(zhǔn)中, 對病毒的檢測標(biāo)準(zhǔn)及其指示生物都沒有做出明確說明, 歸根結(jié)底的原因是由于至今沒有建立起有效的方法。
有鑒于此, 針對水中病毒研究的熱點(diǎn)和存在問題, 本刊2009年第1期發(fā)表了寇曉霞、吳清平等[2]針對自來水和污水兩種不同水體中病毒的濃縮方法。在現(xiàn)有的檢測和濃縮方法的基礎(chǔ)上, 通過不斷創(chuàng)新, 解決現(xiàn)有方法中存在的主要問題, 摸索制約水體中病毒濃縮方法的關(guān)鍵點(diǎn), 評價不同方法的優(yōu)劣和實(shí)用性。三氯化鋁沉淀法zui大的優(yōu)點(diǎn)是可適用于絕大多數(shù)具有不同水質(zhì)特性的水樣, 特別是可以克服膜過濾法因易堵塞而對水體懸浮物濃度有嚴(yán)格限制的缺陷。另外, 就檢測條件而言, 該方法無需過濾裝置等, 也省去進(jìn)口的陽電濾膜, 從應(yīng)用推廣的角度更為方便, 費(fèi)用成本低, 對于系統(tǒng)研究我國水中常見食源性病毒檢測和監(jiān)測有一定的應(yīng)用價值。
目前, 該課題組對水體中病毒濃縮方法進(jìn)行了多方面的應(yīng)用。對廣州河涌水的病毒污染情況進(jìn)行了調(diào)研, 初步了解和掌握了病毒的污染狀況。廣州市河涌水中食源性病毒污染的總陽性率為37.8%。其中有7個點(diǎn)呈諾如病毒陽性, 8個點(diǎn)呈輪狀病毒陽性。文獻(xiàn)[3?4]報道此類病毒的流行月份、季節(jié)性與環(huán)境水中調(diào)查的病毒污染情況基本吻合, 說明了臨床發(fā)病與環(huán)境中此類病毒的污染有一定的相關(guān)性。另外還有些點(diǎn)呈甲肝病毒陽性和星狀病毒陽性。調(diào)研結(jié)果表明三氯化鋁沉淀法濃縮水體中病毒的方法具有實(shí)用性。
關(guān)鍵詞: 水, 病毒, 濃縮, 檢測
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