產(chǎn)品名稱: 人EB病毒衣殼抗原IgA(EB.VCA IgA)ELISA試劑盒
規(guī) 格: 48T/96T
檢測類型:酶聯(lián)免疫/酶免法(ELISA)
保 存:短期4℃/*-20℃保存
檢測范圍:見說明書()
可檢測樣本:血液標(biāo)本,組織液標(biāo)本,尿液標(biāo)本,糞便標(biāo)本,腦脊液標(biāo)本,胸腹水標(biāo)本等(具體詳細(xì)情況請咨詢)
供應(yīng)商:上海研謹(jǐn)生物科技有限公司(國內(nèi)供應(yīng)商)
試劑盒組成及試劑配制
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為1,600 pg/ml,將其稀釋為400 pg/ml后,再做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別稀釋成400 pg/ml,200 pg/ml,100 pg/ml,50 pg/ml,25 pg/ml,12.5 pg/ml,6.25 pg/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 pg/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。如配制200 pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 400 pg/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml。
6. 檢測溶液A:1×120μl(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100μl/孔),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl檢測溶液A加990μl檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
7. 檢測溶液B:1×120μl/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
11. 覆膜:5張
12. 使用說明書:1份
自備物品
1. 酶標(biāo)儀(建議參考儀器使用說明提前預(yù)熱)
2. 微量加液器及吸頭,EP管
3. 蒸餾水或去離子水,全新濾紙目的:本試劑盒用于檢測人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中EB病毒衣殼抗原IgA(EB.VCA IgA)水平。
實(shí)驗(yàn)原理:
本試劑盒采用雙抗原夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA)測定標(biāo)本中人EB病毒衣殼抗原IgA(EB.VCA IgA)。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,可與樣品中EB病毒衣殼抗原IgA(EB.VCA IgA)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合,形成復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標(biāo)本中人EB病毒衣殼抗原IgA(EB.VCA IgA)的存在與否。
結(jié)果判定:
試驗(yàn)有效性:陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10
臨界值(CUT OFF)計(jì)算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15
陰性判定:樣品OD值< 臨界值(CUT OFF)者為EB病毒衣殼抗原IgA(EB.VCA IgA)陰性
陽性判定:樣品OD值≥ 臨界值(CUT OFF)者為EB病毒衣殼抗原IgA(EB.VCA IgA)陽性
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