Anti-Casein/FITC

熒光素標記抗牛酪蛋白抗體IgG

標記抗體（一抗）

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相關知識>>>>>
多克隆抗體的制備一般包括以下幾個步驟：
　　1、制備抗原。 　
　2、選擇實驗動物。
　　3、動物免疫。 　
　4、試取血進行測試，看看是否成功免疫。
　　5、如果成功免疫，殺死實驗動物，采集全部血清。
　　6、純化出抗體。 　
　7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。
　　抗體結(jié)構：
　　抗體是具有4條多肽鏈的對稱結(jié)構，其中2條較長、相對分子量較大的相同的重鏈（H鏈）；2條較短、相對分子量較小的相同的輕鏈（L鏈）。鏈間由二硫鍵和非共價鍵聯(lián)結(jié)形成一個由4條多肽鏈構成的單體分子。輕鏈有κ和λ兩種，重鏈有μ、δ、γ、ε和α五種。 整個抗體分子可分為恒定區(qū)和可變區(qū)兩部分。在給定的物種中，不同抗體分子的恒定區(qū)都具有相同的或幾乎相同的氨基酸序列?？勺儏^(qū)位于"Y"的兩臂末端。在可變區(qū)內(nèi)有一小部分氨基酸殘基變化特別強烈，這些氨基酸的殘基組成和排列順序更易發(fā)生變異區(qū)域稱高變區(qū)。高變區(qū)位于分子表面，zui多由17個氨基酸殘基構成，少則只有2 ～ 3個。高變區(qū)氨基酸序列決定了該抗體結(jié)合抗原抗原的特異性。一個抗體分子上的兩個抗原結(jié)合部位是相同的，位于兩臂末端稱抗原結(jié)合片段（antigen-binding fragment, Fab）。"Y"的柄部稱結(jié)晶片段（crystalline fragment,FC），糖結(jié)合在FC 上。
抗體的親和力 ：
是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小、抗體分子的結(jié)合位點與抗原決定簇之間立體構型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵、疏水鍵、側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力、范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示，K的單位是L/mol，通常K的范圍在 108 ～1010 /mol，也有多達 1014 /mol?？贵w親和力的測定對抗體的篩選，確定抗體的用途，驗證抗體的均一性等均有重要意義。
抗體的效價鑒定：
不管是用于診斷還是用于治療，制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體，要求的效價不一。鑒定效價的方法很多，包括有試管凝集反應、瓊脂擴散試驗、酶聯(lián)免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法，以資比較。如制備抗抗體的效價，一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。
單克隆抗體和多克隆抗體有什么區(qū)別?
抗原上那部分可以引起機體產(chǎn)生抗體的分子結(jié)構，叫做抗原決定簇。一個抗原上可以有好幾個不同的抗原決定簇，因而使機體產(chǎn)生好幾種不同的抗體，zui終產(chǎn)生出抗體是漿細胞。只針對一個抗原決定簇起作用的漿細胞群就是一個純系，純系的英文為Clone，音譯就是克隆。
由一種克隆產(chǎn)生的特異性抗體叫做單克隆抗體。單克隆抗體能目標明確地與單一的特異抗原決定簇結(jié)合，就象導彈精確地命中目標一樣。另一方面，即使是同一個抗原決定簇，在機體內(nèi)也可以由好幾種克隆來產(chǎn)生抗體，形成好幾種單克隆抗體混雜物，稱為多克隆抗體。