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規(guī)格	5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶	組織來源	睪丸組織
貨號(hào)	CS-X3203	細(xì)胞形態(tài)	球形

商品介紹：

產(chǎn)品名稱：大鼠精原干細(xì)胞
2.組織來源：睪丸組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介：

大鼠精原干細(xì)胞分離自睪丸組織；精原干細(xì)胞是位于睪丸生精小管的生精上皮內(nèi)的一群生精干細(xì)胞，是成體內(nèi)的定向干細(xì)胞。精原干細(xì)胞的一些優(yōu)勢(shì)使其成為動(dòng)物轉(zhuǎn)基因的理想宿主細(xì)胞。精原干細(xì)胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化等多項(xiàng)生命活動(dòng)的調(diào)節(jié)機(jī)制的深入研究，精子發(fā)生機(jī)理的進(jìn)一步闡明以及精原干細(xì)胞轉(zhuǎn)染，異體、異種移植技術(shù)的實(shí)際應(yīng)用，都迫切需要找到一種可行的方法將其分離純化，以期得到較高產(chǎn)量和純度的有活力的精原細(xì)胞用于體外培養(yǎng)。在哺乳動(dòng)睪丸內(nèi)，精子發(fā)生時(shí)一個(gè)受高度調(diào)控和持續(xù)的過程，精原干細(xì)胞（SSCs）一方面進(jìn)行自我更新維持干細(xì)胞數(shù)量，另一方面又不斷執(zhí)行分化成各級(jí)生精細(xì)胞直至后生成精子。精原干細(xì)胞定居在曲精細(xì)管上皮的基膜處，是哺乳動(dòng)物精子發(fā)生的原始細(xì)胞，也是動(dòng)物體內(nèi)一起能將遺傳信息傳遞的干細(xì)胞。精原干細(xì)胞體外培養(yǎng)體系的建立，在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、畜牧業(yè)生產(chǎn)及制備轉(zhuǎn)基因動(dòng)物等領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。精原干細(xì)胞（SSCs）是生精上皮近基底膜的一群細(xì)胞，具有自我更新能力和多向分化潛能，是哺乳動(dòng)物體內(nèi)能將遺傳信息傳遞給下一代的成體干細(xì)胞。

5.方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠精原干細(xì)胞采用先機(jī)械吹打、后yi蛋白酶消化，結(jié)合Percoll密度梯度離心法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠精原干細(xì)胞經(jīng)CD44免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性懸浮

細(xì)胞形態(tài) 球形

傳代特性可傳3代左右

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

產(chǎn)品信息：

貨號(hào)	CS-X3203	組織來源	睪丸組織
傳代特性	可傳3代左右	培養(yǎng)基	含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
細(xì)胞形態(tài)	球形	生長特性	懸浮
培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；CO2，5%	換液頻率	每2-3天換液一次

大鼠精原干細(xì)胞

細(xì)胞保存方法：

（一）細(xì)胞凍存

1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液；

2. 取對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞，去除舊培養(yǎng)液，用PBS清洗。

3. 去除PBS，加入適量（覆蓋培養(yǎng)皿表面）把單層生長的細(xì)胞消化下來；

4. 離心1000rpm，5min；

5. 去除，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，計(jì)數(shù)，調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的最終密度為5×106/ml～1×107/ml；

6. 將細(xì)胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml；

7. 在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱，凍存時(shí)間及操作者；

8. 凍存：標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1～-2℃/ min；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí)，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時(shí)，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內(nèi)。

大鼠精原干細(xì)胞

注意事項(xiàng)：

1）、欲冷凍保存之細(xì)胞應(yīng)在生長良好且存活率高之狀態(tài)，約為80～90%致密度。冷凍前檢測(cè)細(xì)胞是否仍保有其性質(zhì)，應(yīng)在冷凍保存前一至二日測(cè)試是否有抗體之產(chǎn)生。

2）、細(xì)胞在液氮中可長期凍存無，而不會(huì)影響細(xì)胞活力;在-70度可保存數(shù)月。

3）、注意冷凍保護(hù)劑之品質(zhì)。DMSO應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí)，無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產(chǎn)品，如Sigma D-2650)，以5～10 ml小體積分裝，4 ℃避光保存，勿作多次解凍。Glycerol亦應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí)，以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用，因長期儲(chǔ)存后對(duì)細(xì)胞會(huì)有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液，可避免DMSO直接加入時(shí)釋放的熱量對(duì)細(xì)胞的損傷。緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液是使細(xì)胞逐步適應(yīng)高滲，可降低細(xì)胞受損。DMSO可能引起部分白血病細(xì)胞株的分化，可換用10%甘油凍存。

操作步驟：

1）、冷凍前24-48小時(shí)更換半量或全量培養(yǎng)基，使細(xì)胞處于指數(shù)生長期。

2）、配制冷凍保存溶液(使用前配制)：另取一離心管，加入培養(yǎng)基、血清，逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度，即制成雙倍的凍存液，置于室溫下待用。

3）、離心收集培養(yǎng)之細(xì)胞，用加血清的培養(yǎng)基重懸起細(xì)胞，取少量細(xì)胞懸浮液(約0. 1 ml)計(jì)數(shù)細(xì)胞濃度及凍前存活率。

4）、取與細(xì)胞懸液等量的凍存液，緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液，并晃動(dòng)試管，制成細(xì)胞凍存懸液(DMSO后濃度為5～10%)，使細(xì)胞濃度為1～5×106cells/ ml，混合均勻，分裝于已標(biāo)示之冷凍保存管中，1～2 ml/vial，并取少量細(xì)胞懸浮液作污染檢測(cè)。嚴(yán)密封口后，注明細(xì)胞名稱、代數(shù)、日期。然后進(jìn)行凍存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

人腎小管上皮細(xì)胞	人高密度脂蛋白3(HDL3)檢測(cè)試劑盒
大鼠腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞	人熱休克蛋白60(Hsp-60)檢測(cè)試劑盒
大鼠視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞	人丁酰酯mei(BCHE)試劑盒ELISA
大鼠外周血白細(xì)胞	人S100鈣結(jié)合蛋白A11(S100A11)檢測(cè)試劑盒
大鼠下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞	人乳頭瘤病毒14 PCR試劑盒
大鼠心臟干細(xì)胞	白薇染料法PCR鑒定試劑盒
大鼠雪旺氏細(xì)胞	玉米BT PCR檢測(cè)試劑盒
大鼠羊膜上皮細(xì)胞	腸道病毒EV70 PCR檢測(cè)試劑盒
大鼠陰莖白膜成纖維細(xì)胞	輪狀病毒通用RT-PCR試劑盒（停）
大鼠終板軟骨細(xì)胞	禽正呼腸孤病毒RT-PCR試劑盒
大鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞	禽戊型肝炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒
人表皮黑色素細(xì)胞	瘰疬分枝桿菌PCR試劑盒
雞氣管上皮細(xì)胞	大鼠精原干細(xì)胞魯氏不動(dòng)桿菌PCR檢測(cè)試劑盒
人肺成纖維細(xì)胞	禽輪狀病毒PCR檢測(cè)試劑盒
人腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞	豬弓形蟲PCR檢測(cè)試劑盒