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英文名稱 | Recombinant Matrix Metalloproteinase 12 (MMP12) | 物種 | Mus musculus (Mouse,小鼠) |
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型號 | CS-D186 | 性狀 | 凍干粉 |
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP12)重組蛋白
產(chǎn)品名稱:基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP12)重組蛋白
英文名稱:Recombinant Matrix Metalloproteinase 12 (MMP12)
MME; HME; ME; Macrophage Metalloelastase; Macrophage Elastase
型號:CS-D186
酶與激酶
腫瘤免疫
感染免疫
物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細(xì)胞定位::分泌, 細(xì)胞外基質(zhì)
預(yù)測分子量:22.6kDa
實際分子量:23kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Ala294~Cys473 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點:9.3
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格:10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白實驗注意事項:
1、樣本處理:
采樣、存儲和處理樣本要規(guī)范,避免凍融循環(huán)。防止樣本污染,保持樣本的純度。
2、樣本分離和制備:
使用合適的分離方法,如SDS-PAGE或液相色譜。保持儀器和試劑的干凈,防止污染。
3、樣本標(biāo)記和標(biāo)準(zhǔn)化:
選擇合適的蛋白質(zhì)標(biāo)記方法,確保標(biāo)記效率和穩(wěn)定性。
4、質(zhì)譜分析:
確保質(zhì)譜儀和其他相關(guān)設(shè)備的校準(zhǔn)和性能處于狀態(tài),并保持質(zhì)譜分析條件的一致
5、數(shù)據(jù)處理和分析:
峰提取、質(zhì)譜校準(zhǔn)和蛋白質(zhì)定量要仔細(xì)進行,使用專業(yè)工具。使用統(tǒng)計學(xué)方法分析數(shù)據(jù),進行多重假設(shè)校正。
6、技術(shù)重復(fù)和質(zhì)量控制:
進行技術(shù)重復(fù),包括陽性和陰性對照組。確保實驗的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。
蛋白方法/步驟:
一、其中碳?xì)浔谎趸癁槎趸己退莩?,蛋白質(zhì)中的氮轉(zhuǎn)化為氨與硫酸結(jié)合生成硫酸氯在硫酸中,然后加堿蒸餾,使氨逸出,用硼酸吸收,再以硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定。根據(jù)酸的消耗量乘以換算系數(shù)為蛋白質(zhì)含量。筆者根據(jù)多年來操作經(jīng)驗認(rèn)為,
在檢驗過程中應(yīng)注意如下三個環(huán)節(jié)。一、樣品、試劑加入量的控制。
二、1.稱取試樣的多少取決于樣品中蛋白質(zhì)的高低。蛋白質(zhì)中含氮量較恒定,通常是通過測定食品中氮的含量來確定蛋白質(zhì)的含量。一般固體樣品稱取0.2-2.0g,半固體樣品稱取2—5g,液體樣品吸取10-20ml。樣品中含氮量低的可增加稱樣量。
三、2.硫酸的加入量,通常加20ml,但試樣量如超過5g時,應(yīng)按每克試樣5ml的比例增加硫酸用量。否則試樣消化不造成結(jié)果偏低。3.消泡劑的加入。含脂肪或糖較多的食品在消化時產(chǎn)生大量泡沫,溢出瓶外,造成氮的損失,所以消化前可加入少量消泡齊lj。如:液體石蠟、硅消泡劑等。
四、4.催化劑的加入量要適宜硫酸銅是的催化劑,效果好,價格便宜,環(huán)境污染小,而且是蒸餾加堿時的指示劑。硫酸鉀可加快有機物的分解,使硫酸沸點從34.0℃提高到40.0℃以上,但加入量不能太大,否則溫度過高會使銨鹽分解而文——胡惠敏造成損失,除硫酸鉀外硫酸鈉也有同樣作用。5.難消化的樣品還可適當(dāng)加入少量過氧化氫,次氯酸鈉等氧化劑加速有機物氧化。
五、二、樣品消化處理。1.樣品一定要移入干燥的凱氏燒瓶中,否則樣品易粘在瓶壁上不易消化。加硫酸時應(yīng)將附在瓶壁上的粉末仔細(xì)洗至瓶中,使樣品全部消化。還有在消化時注意轉(zhuǎn)動凱氏燒瓶,利用冷凝酸液將附在瓶壁上的碳粒沖下促進消化。2.樣品與試劑加入搖勻后瓶口應(yīng)放一小漏斗,將瓶傾斜45。角斜至有小孔的石棉網(wǎng)上,小心加熱,避免噴濺。待瓶內(nèi)試樣全部碳化,泡沫停止后,再加強火力,并保持瓶內(nèi)液體微沸,至液體呈澄清透明的藍(lán)綠色后再加熱半小時,樣品即消化。三、蒸餾過程中條件的控制。
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