細(xì)胞周期與凋亡檢測試劑盒

商品屬性：

商品介紹：

產(chǎn)品原理：本產(chǎn)品檢測原理基于碘化丙啶（Propidium, PI）染色方法分析細(xì)胞周期和凋亡。碘化丙啶是一種雙鏈DNA染料，其嵌入雙鏈DNA中可以產(chǎn)生熒光，并且熒光的強(qiáng)度和雙鏈DNA的量成正比。

在細(xì)胞周期中，G0和G1期細(xì)胞有一套染色體，G2和M期細(xì)胞有兩套染色體，S期介于兩者之間。經(jīng)過碘化丙啶染色后，處在不同細(xì)胞周期中的細(xì)胞的熒光強(qiáng)度是不一樣的。假定G0和G1期的細(xì)胞熒光強(qiáng)度為1，那么G2和M期的細(xì)胞的熒光強(qiáng)度為2，S期的細(xì)胞介于1和2之間。

細(xì)胞凋亡時，由于細(xì)胞核皺縮和DNA片段化，染色時DNA片段會從打孔的細(xì)胞膜處丟失，流式細(xì)胞儀檢測時，熒光強(qiáng)度小于1，即Sub-G1峰或者凋亡細(xì)胞峰。

細(xì)胞凋亡也可以用流式細(xì)胞儀觀察細(xì)胞光散射的變化來檢測。凋亡前期，染色質(zhì)皺縮，細(xì)胞密度增加，前向角光散色顯著降低。凋亡后期，細(xì)胞產(chǎn)生凋亡小體，前向角光散射和側(cè)向角光散色都顯著降低。

產(chǎn)品適用：本試劑盒可用于培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞或者懸浮細(xì)胞檢測，也可用于組織細(xì)胞檢測。

保存條件：-20°避光條件下，保存1年以上，4°避光條件下，可以保存2個月。

步驟和注意事項：?

準(zhǔn)備實驗環(huán)境：?確保實驗區(qū)域清潔，?使用酒精清潔計數(shù)板和蓋玻片，?然后用吸水紙輕輕擦干。?

細(xì)胞培養(yǎng)：?

準(zhǔn)備試管或培養(yǎng)皿、?細(xì)胞培養(yǎng)基和待培養(yǎng)的細(xì)胞。?

取出保存于低溫下的細(xì)胞苗，?并加入培養(yǎng)基中，?搖晃混合均勻。?

用移液管將細(xì)胞培養(yǎng)基和細(xì)胞種植在試管或培養(yǎng)皿中。?

將試管或培養(yǎng)皿放置于恒溫培養(yǎng)箱中，?定期更換培養(yǎng)液。?

細(xì)胞凍存與復(fù)蘇：?

細(xì)胞系的凍存是將生長較好的傳代細(xì)胞懸浮在加有冷凍保護(hù)劑的溶液中，?以一定的冷凍速率降至零下某一溫度，?并在此溫度下對其長期保存的過程。?

復(fù)蘇則是將凍存的細(xì)胞系恢復(fù)到常溫的過程，?原則是“慢凍快融"，?以較大限度地保存細(xì)胞活力。?

細(xì)胞計數(shù)：?

制備細(xì)胞懸液，?使用消化單層培養(yǎng)細(xì)胞或收集懸浮培養(yǎng)細(xì)胞，?制成單個細(xì)胞懸液。?

在顯微鏡下，?用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格中的細(xì)胞數(shù)，?細(xì)胞壓中線時，?只計左側(cè)和上方者，?不計右側(cè)和下方者。?

熒光顯微鏡使用：?

使用熒光染料對細(xì)胞進(jìn)行染色，?并觀察細(xì)胞所發(fā)出的熒光信號，?以研究細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能。?

聚合酶鏈反應(yīng)（?PCR）?：?

準(zhǔn)備PCR反應(yīng)所需的DNA模板、?引物、?聚合酶和核苷酸。?

按照PCR反應(yīng)液配制表制備反應(yīng)液。?

在反應(yīng)器中加入反應(yīng)液，?開始PCR反應(yīng)。?

PCR反應(yīng)的成功與否，?可以通過電泳、?測序等方法進(jìn)一步確認(rèn)。?

轉(zhuǎn)染：?

準(zhǔn)備轉(zhuǎn)染所需的載體DNA和細(xì)胞。?

制備轉(zhuǎn)染試劑，?將DNA載體溶解于轉(zhuǎn)染試劑中，?與細(xì)胞混合均勻。?

處理轉(zhuǎn)染細(xì)胞，?并進(jìn)行下一步實驗。?

在操作過程中，?應(yīng)注意實驗室安全規(guī)范，?避免隨意丟棄垃圾，?及時登記購買耗材或試劑，?保持實驗環(huán)境的清潔和安全

下列是公司正在出售的產(chǎn)品：