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當前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細胞生物學試劑>>細胞凋亡與增殖>> 支原體檢測試劑盒細胞凋亡與增殖
貨號 | CS-C6250 | 貨期 | 1~3天 |
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規(guī)格 | 100T-200T | 英文名稱 | Mycoplasma Detection Kit |
用途 | 僅供科研研究實驗 |
注意事項:
1. 本試劑盒的檢測試劑中含有螢光素酶,反復凍融會導致其逐漸失活。盡管經(jīng)測試本試劑反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,為取得良好的使用效果,*次解凍后可適當分裝保存。反復凍融過程中,可能會導致檢測試劑中出現(xiàn)少量沉淀,此時宜平衡至室溫,并盡量溶解。如仍有殘留的不溶物,可以離心去除后使用,經(jīng)測試不會影響后續(xù)的檢測效果。
2. 檢測時需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板,相鄰孔之間會產(chǎn)生相互干擾。
3. 支原體檢測試劑盒細胞凋亡與增殖使用說明中提供了檢測ATP標準品的方法,實際檢測細胞活力時通常并不需要檢測ATP標準品。
操作步驟:
貼壁細胞:
1.被檢細胞接種于無菌的6孔細胞培養(yǎng)板中,接種密度為1-2×104。同時,接種正常無支原體感染的同種細胞,作為陰性對照。
2.5天后,先吸去培養(yǎng)液,再加入1ml的固定液,靜置20min,
3.吸去固定液,晾干。
4.于每孔中,加入1ml的Hoechst33258工作液(Hoechst 33258工作液須覆蓋全部被檢細胞),37℃避光放置15-20min或室溫靜置20~30min。
5.吸去Hoechst 33258工作液,加入2ml滅菌超純水洗滌三次,直接風干。風干后加入一滴封片液,并以蓋玻片覆蓋。
6.熒光顯微鏡觀察。用紫外激發(fā)光激發(fā),觀察細胞周圍是否有藍色熒光小點或串珠狀熒光小點。
懸浮細胞:
1.收集需檢測的細胞,1500rpm,5min。
2.將收集的細胞涂片于載玻片上,再加1ml的固定液,靜置20min。
3.吸去固定液,晾干。
4.于每孔中,加入1ml的Hoechst33258工作液(Hoechst 33258工作液須覆蓋全部被檢細胞),37℃避光放置15~20min或室溫靜置20~30min。
產(chǎn)品名稱 | 支原體檢測試劑盒細胞凋亡與增殖 | 貨號 | CS-C6250 |
英文名稱 | Mycoplasma Detection Kit | 規(guī)格 | 100T-200T |
本試劑盒是利用熒光染料檢測支原體污染。這種染料會結(jié)合到DNA的A-T富集區(qū)域,因為支原體的DNA中A-T含量高(55%~80%),所以可將其染色而被檢測到。被支原體污染的細胞經(jīng)染色后在細胞周圍可看到許多大小均一的熒光小點,即為支原體的DNA染色斑,說明有支原體污染。Hoechst 33258的大激發(fā)波長為346nm,大發(fā)射波長為460nm;Hoechst 33258和雙鏈DNA結(jié)合后,大激發(fā)波長為352nm,大發(fā)射波長為461nm。
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細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
細胞生物學研究的常用技術(shù)有哪些:
1.顯微技術(shù):包括顯微觀察,顯微操作.
2細胞組分分析技術(shù):離心分離技術(shù),生物大分子定位技術(shù),定量細胞化學分析技術(shù).
3.細胞工程:細胞培養(yǎng)。
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