細胞活力檢測試劑盒細胞凋亡與增殖

商品屬性：

商品介紹：

本試劑盒是一種通過化學(xué)發(fā)光法測定細胞內(nèi)ATP含量從而來定量檢測活細胞數(shù)目的試劑盒。本試劑盒的性能和用途與公司的同類產(chǎn)品基本相同，對于相同的細胞樣品本試劑盒的發(fā)光效果更強一些。

本試劑盒比常見的MTT、alamarBlue、Calcein-AM、WST-1、CCK-8等其它細胞活力測定方法更加簡單快捷。只需把試劑盒提供的檢測試劑與培養(yǎng)細胞等體積混合，反應(yīng)10分鐘后即可進行化學(xué)發(fā)光檢測。無需洗滌細胞，也無需更換或去除培養(yǎng)液。并且化學(xué)發(fā)光非常穩(wěn)定，在反應(yīng)開始后的10分鐘內(nèi)無顯著變化，30分鐘內(nèi)的下降不超過10%。

本試劑盒不僅適合少量樣品的檢測，也非常適合大量樣品的高通量篩選檢測。

本試劑盒線性范圍廣，檢測靈敏度高。用96孔板進行檢測時，本試劑盒在0-50,000個細胞/孔的細胞密度范圍內(nèi)有良好的檢測效果，并且在僅有幾百個細胞時仍有良好的線性關(guān)系。當細胞數(shù)量僅為50個/孔時，發(fā)光強度可達空白孔的5倍左右。

ATP，作為重要的能量分子，在細胞的各種生理、病理過程中起著重要作用。ATP是細胞新陳代謝的一個重要指標，也是具有代謝活性細胞的重要標志性分子，并和活細胞數(shù)目成良好的線性關(guān)系。因此，ATP含量能很好地反應(yīng)活細胞的數(shù)目，即本試劑盒可以通過測定ATP含量來進行細胞計數(shù)或檢測細胞活力。

本試劑盒通過ATP檢測細胞活力的原理參考下圖。借助ATP依賴的螢光素酶催化的螢光素發(fā)光反應(yīng)，ATP可以通過測定化學(xué)發(fā)光來進行定量。由于ATP含量能很好地反映活細胞的數(shù)目，而ATP含量和發(fā)光強度成正比，這樣就可以簡單地通過化學(xué)發(fā)光強度來計算出細胞活力或細胞數(shù)目。

細胞活力檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光法)檢測ATP的原理圖

對于96孔板，我們推薦使用100μl細胞培養(yǎng)液和100μl的檢測試劑，總體積為200μl，此時本試劑盒可以進行100次檢測。對于384孔板，我們推薦使用25μl細胞培養(yǎng)液和25μl的檢測試劑，總體積為50μl，此時本試劑盒可以進行400次檢測。也可以用其它體積的試劑進行檢測，但細胞培養(yǎng)液和檢測試劑體積的比例必須為1:1。

儲存條件：室溫，有效期2年。

步驟和注意事項：?

準備實驗環(huán)境：?確保實驗區(qū)域清潔，?使用酒精清潔計數(shù)板和蓋玻片，?然后用吸水紙輕輕擦干。?

細胞培養(yǎng)：?

準備試管或培養(yǎng)皿、?細胞培養(yǎng)基和待培養(yǎng)的細胞。?

取出保存于低溫下的細胞苗，?并加入培養(yǎng)基中，?搖晃混合均勻。?

用移液管將細胞培養(yǎng)基和細胞種植在試管或培養(yǎng)皿中。?

將試管或培養(yǎng)皿放置于恒溫培養(yǎng)箱中，?定期更換培養(yǎng)液。?

細胞凍存與復(fù)蘇：?

細胞系的凍存是將生長較好的傳代細胞懸浮在加有冷凍保護劑的溶液中，?以一定的冷凍速率降至零下某一溫度，?并在此溫度下對其長期保存的過程。?

復(fù)蘇則是將凍存的細胞系恢復(fù)到常溫的過程，?原則是“慢凍快融"，?以較大限度地保存細胞活力。?

細胞計數(shù)：?

制備細胞懸液，?使用消化單層培養(yǎng)細胞或收集懸浮培養(yǎng)細胞，?制成單個細胞懸液。?

在顯微鏡下，?用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格中的細胞數(shù)，?細胞壓中線時，?只計左側(cè)和上方者，?不計右側(cè)和下方者。?

熒光顯微鏡使用：?

使用熒光染料對細胞進行染色，?并觀察細胞所發(fā)出的熒光信號，?以研究細胞結(jié)構(gòu)和功能。?

聚合酶鏈反應(yīng)（?PCR）?：?

準備PCR反應(yīng)所需的DNA模板、?引物、?聚合酶和核苷酸。?

按照PCR反應(yīng)液配制表制備反應(yīng)液。?

在反應(yīng)器中加入反應(yīng)液，?開始PCR反應(yīng)。?

PCR反應(yīng)的成功與否，?可以通過電泳、?測序等方法進一步確認。?

轉(zhuǎn)染：?

準備轉(zhuǎn)染所需的載體DNA和細胞。?

制備轉(zhuǎn)染試劑，?將DNA載體溶解于轉(zhuǎn)染試劑中，?與細胞混合均勻。?

處理轉(zhuǎn)染細胞，?并進行下一步實驗。?

在操作過程中，?應(yīng)注意實驗室安全規(guī)范，?避免隨意丟棄垃圾，?及時登記購買耗材或試劑，?保持實驗環(huán)境的清潔和安全

下列是公司正在出售的產(chǎn)品：