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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細胞生物學(xué)試劑>>細胞凋亡與增殖>> 臺盼藍染色法細胞活力檢測試劑盒細胞凋亡
貨號 | CS-C6154 | 貨期 | 1~3天 |
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規(guī)格 | 100T | 英文名稱 | Typan Blue Staining Cell Viability Assay Kit |
用途 | 僅供科研研究實驗 |
注意事項:
1. 本試劑盒的檢測試劑中含有螢光素酶,反復(fù)凍融會導(dǎo)致其逐漸失活。盡管經(jīng)測試本試劑反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,為取得良好的使用效果,*次解凍后可適當(dāng)分裝保存。反復(fù)凍融過程中,可能會導(dǎo)致檢測試劑中出現(xiàn)少量沉淀,此時宜平衡至室溫,并盡量溶解。如仍有殘留的不溶物,可以離心去除后使用,經(jīng)測試不會影響后續(xù)的檢測效果。
2. 檢測時需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板,相鄰孔之間會產(chǎn)生相互干擾。
3. 臺盼藍染色法細胞活力檢測試劑盒細胞凋亡使用說明中提供了檢測ATP標準品的方法,實際檢測細胞活力時通常并不需要檢測ATP標準品。
使用方法
1)對于懸浮細胞,離心收集細胞,對其充分清洗后,加入適量細胞重懸液重懸細胞制成單細胞懸液;對于貼壁細胞,先用消化細胞,再按照懸浮細胞的方法制備單細胞懸液。
2)取0.1ml單細胞懸液,按照1:1比例與0.1ml 0.4%臺盼藍染色液充分混勻,室溫染色3~10min。
【注】:因臺盼藍具有細胞毒性,染色時間過久會導(dǎo)致部分死細胞染色,干擾計數(shù)。通常染色3min即可。
3)取少量上述染色細胞加入血細胞計數(shù)板,于顯微鏡低倍鏡下計數(shù),分別計算著色細胞(即損傷細胞和死細胞)和總細胞。
【注1】:用移液槍加染色細胞時,沿著蓋玻片的邊緣輕輕加液使其覆蓋住整個小室。不可過量加液或者不足量。
【注2】:1mm2方格內(nèi)細胞數(shù)通??刂圃?0-50 cells,當(dāng)細胞數(shù)超過200個,需重新調(diào)整稀釋倍數(shù)。
4)按照以下公式來計算細胞數(shù)目和活細胞百分比,
a,計算每ml細胞數(shù)目:Cells/ml=1mm2大方格內(nèi)的平均細胞數(shù)×稀釋倍數(shù)×104;【注】:此時的稀釋倍數(shù)為:步驟2所取的單細胞懸液與臺盼藍染色液混合后的稀釋倍數(shù)
b,總細胞數(shù)目:Total cells=(Cells/ml)×初制備單細胞懸液的總體積
c,細胞活力值:Viability(%)=(總細胞數(shù)-總著色細胞數(shù))/總細胞數(shù)×100
【注】:通常情況,健康的對數(shù)期培養(yǎng)細胞,活細胞至少占到95%。
儲存條件:室溫,有效期2年
產(chǎn)品名稱 | 臺盼藍染色法細胞活力檢測試劑盒細胞凋亡 | 貨號 | CS-C6154 |
英文名稱 | Typan Blue Staining Cell Viability Assay Kit | 規(guī)格 | 100T |
本試劑盒各組分均以無菌形式提供,可直接用于細胞實驗。臺盼藍(Trypan Blue),一種偶氮、親水性酸性藍色染料,可透過死亡細胞和垂死細胞的細胞膜,將其染成藍色,而活細胞由于其細胞膜的完整性,可將臺盼藍排斥在外,因此,通過顏色的變化即可將活細胞(活細胞呈透明無色)和死細胞鑒別開來,基于此原理,本品廣泛用于細胞活性水平的常規(guī)評估。臺盼藍還可染色膠原和淀粉樣蛋白。臺盼藍與蛋白結(jié)合形成的復(fù)合物可發(fā)出紅色熒光。另外,臺盼藍(合適濃度)還常用來淬滅細胞表面的自熒光或者其他熒光信號。
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細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
細胞生物學(xué)研究的常用技術(shù)有哪些:
1.顯微技術(shù):包括顯微觀察,顯微操作.
2細胞組分分析技術(shù):離心分離技術(shù),生物大分子定位技術(shù),定量細胞化學(xué)分析技術(shù).
3.細胞工程:細胞培養(yǎng)。
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