高保真KOD試劑盒細胞凋亡與增殖

商品介紹：

KOD DNA polymerase 是從克隆有α –型高保真DNA聚合酶的大腸桿菌中分離純化所得，具有3`→5`核酸外切酶活性，保真性能比普通Taq聚合酶高80倍。具有較高的延伸速率，在推薦的條件下大于每分鐘2kb，PCR產(chǎn)物為平端，可與直接接入本公司Blunt平端連接載體中。用于高保真、快速擴增目標DNA，環(huán)拉法引入點突變，補平DNA粘性末端等。

商品屬性：

經(jīng)酶切實驗檢測無外源核酸酶污染，PCR方法未檢測到宿主DNA殘留，能夠有效擴增大腸桿菌基因組DNA。

酶活定義：

在推薦的緩沖反應體系中，以大馬哈魚精DNA為模板，68℃、30min內(nèi)合成10nmol核酸所需要的酶量為一個活性單位。

保存條件：

儲存溶液為：50mM Tris-HCl（pH7.6），50mM KCl，1mM DTT，0.1mM EDTA，50%(V/V) glycerol，－20℃存放一年，無明顯活性喪失。冰袋運輸 。

步驟和注意事項：?

準備實驗環(huán)境：?確保實驗區(qū)域清潔，?使用酒精清潔計數(shù)板和蓋玻片，?然后用吸水紙輕輕擦干。?

細胞培養(yǎng)：?

準備試管或培養(yǎng)皿、?細胞培養(yǎng)基和待培養(yǎng)的細胞。?

取出保存于低溫下的細胞苗，?并加入培養(yǎng)基中，?搖晃混合均勻。?

用移液管將細胞培養(yǎng)基和細胞種植在試管或培養(yǎng)皿中。?

將試管或培養(yǎng)皿放置于恒溫培養(yǎng)箱中，?定期更換培養(yǎng)液。?

細胞凍存與復蘇：?

細胞系的凍存是將生長較好的傳代細胞懸浮在加有冷凍保護劑的溶液中，?以一定的冷凍速率降至零下某一溫度，?并在此溫度下對其長期保存的過程。?

復蘇則是將凍存的細胞系恢復到常溫的過程，?原則是“慢凍快融"，?以較大限度地保存細胞活力。?

細胞計數(shù)：?

制備細胞懸液，?使用消化單層培養(yǎng)細胞或收集懸浮培養(yǎng)細胞，?制成單個細胞懸液。?

在顯微鏡下，?用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格中的細胞數(shù)，?細胞壓中線時，?只計左側(cè)和上方者，?不計右側(cè)和下方者。?

熒光顯微鏡使用：?

使用熒光染料對細胞進行染色，?并觀察細胞所發(fā)出的熒光信號，?以研究細胞結(jié)構和功能。?

聚合酶鏈反應（?PCR）?：?

準備PCR反應所需的DNA模板、?引物、?聚合酶和核苷酸。?

按照PCR反應液配制表制備反應液。?

在反應器中加入反應液，?開始PCR反應。?

PCR反應的成功與否，?可以通過電泳、?測序等方法進一步確認。?

轉(zhuǎn)染：?

準備轉(zhuǎn)染所需的載體DNA和細胞。?

制備轉(zhuǎn)染試劑，?將DNA載體溶解于轉(zhuǎn)染試劑中，?與細胞混合均勻。?

處理轉(zhuǎn)染細胞，?并進行下一步實驗。?

在操作過程中，?應注意實驗室安全規(guī)范，?避免隨意丟棄垃圾，?及時登記購買耗材或試劑，?保持實驗環(huán)境的清潔和安全

下列是公司正在出售的產(chǎn)品：