CCCP(50mM) 細胞凋亡誘導劑

商品介紹：

本品是溶于DMSO的CCCP溶液，濃度為50mM，體積為100μl（相當于1mg的總量），常用作一種陽性對照來誘導細胞凋亡，并配合線粒體膜電位檢測探針JC-1（貨號SY0488）或者JC-10（貨號SY0490）來進行相關研究。

商品屬性：

CCCP，即Carbonyl cyanide 3-chlorophenylhydrazone，一種質子載體（H+ ionophore），是一種強效的線粒體氧化磷酸化解偶聯(lián)劑，促使線粒體內膜對H+產生通透性，導致線粒體內膜兩側的膜電位喪失，誘導凋亡發(fā)生。也可作用于葉綠體膜，抑制光合作用；CCCP還可抑制內質網(wǎng)-高爾基體（ER-Golgi）之間的蛋白轉運，高親和力結合細胞se素C氧化酶。

CCCP還具有其他功能：

1）在牛蛙交感神經方面的實驗表明，CCCP 可增強促黃體生成素釋放激素的釋放；

2）作為一種質子導體在葡萄糖存在的情況下影響E.coli 細胞活性；

3）對細胞內鈣水平的各種調節(jié)效應；

4）抑制脂肝酶的分泌；

5）部分抑制pH梯度活化的Cl-攝取以及刷狀緣膜的Cl-/Cl-交換等。

儲存條件：-20℃，有效期12個月

步驟和注意事項：?

準備實驗環(huán)境：?確保實驗區(qū)域清潔，?使用酒精清潔計數(shù)板和蓋玻片，?然后用吸水紙輕輕擦干。?

細胞培養(yǎng)：?

準備試管或培養(yǎng)皿、?細胞培養(yǎng)基和待培養(yǎng)的細胞。?

取出保存于低溫下的細胞苗，?并加入培養(yǎng)基中，?搖晃混合均勻。?

用移液管將細胞培養(yǎng)基和細胞種植在試管或培養(yǎng)皿中。?

將試管或培養(yǎng)皿放置于恒溫培養(yǎng)箱中，?定期更換培養(yǎng)液。?

細胞凍存與復蘇：?

細胞系的凍存是將生長較好的傳代細胞懸浮在加有冷凍保護劑的溶液中，?以一定的冷凍速率降至零下某一溫度，?并在此溫度下對其長期保存的過程。?

復蘇則是將凍存的細胞系恢復到常溫的過程，?原則是“慢凍快融"，?以較大限度地保存細胞活力。?

細胞計數(shù)：?

制備細胞懸液，?使用消化單層培養(yǎng)細胞或收集懸浮培養(yǎng)細胞，?制成單個細胞懸液。?

在顯微鏡下，?用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格中的細胞數(shù)，?細胞壓中線時，?只計左側和上方者，?不計右側和下方者。?

熒光顯微鏡使用：?

使用熒光染料對細胞進行染色，?并觀察細胞所發(fā)出的熒光信號，?以研究細胞結構和功能。?

聚合酶鏈反應（?PCR）?：?

準備PCR反應所需的DNA模板、?引物、?聚合酶和核苷酸。?

按照PCR反應液配制表制備反應液。?

在反應器中加入反應液，?開始PCR反應。?

PCR反應的成功與否，?可以通過電泳、?測序等方法進一步確認。?

轉染：?

準備轉染所需的載體DNA和細胞。?

制備轉染試劑，?將DNA載體溶解于轉染試劑中，?與細胞混合均勻。?

處理轉染細胞，?并進行下一步實驗。?

在操作過程中，?應注意實驗室安全規(guī)范，?避免隨意丟棄垃圾，?及時登記購買耗材或試劑，?保持實驗環(huán)境的清潔和安全

下列是公司正在出售的產品：