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規(guī)格	1×106cells/T25培養(yǎng)瓶	種屬	人
貨號	CS-X2362	細胞形態(tài)	淋巴母細胞樣

產(chǎn)品信息：

貨號	CS-X2362	種屬	人
生長特性	懸浮細胞	細胞形態(tài)	淋巴母細胞樣
溫度	液氮	培養(yǎng)條件:	氣相：空氣，95%；CO2，5%
鑒定	STR鑒定正確	生長培養(yǎng)基	IMDM＋20% FBS＋1% P/S

HuT 78 (人T淋巴細胞白血病細胞)

商品介紹：

產(chǎn)品名稱：HuT 78 (人T淋巴細胞白血病細胞)
別稱 HUT 78; HuT-78; HUT-78; HuT78; Hut78; HUT78; NCI-H78

種屬人類

年齡（性別）男性，53歲

組織來源疾病：皮膚白血病(塞扎里綜合癥)；細胞類型：皮膚T淋巴細胞

生長特性懸浮細胞

細胞形態(tài) 淋巴母細胞樣

背景描述 HuT 78細胞是由A.F.Gazdar于1981年從一名53歲患有塞扎萊綜合癥的白人男性外周血中分離并建立。HuT 78細胞具有成熟T細胞的誘導(dǎo)－輔助特性。HuT 78細胞的表面能提出具有生物活性的IL-2。

生物安全等級 1

生長培養(yǎng)基 IMDM＋20% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 3×10^5-5×10^5cells/mL

推薦換液頻率 2~3次/周

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

致瘤性 Yes, in nude mice when injected intracranially.

受體表達情況 interleukin 2 (IL-2), expressed

抗原表達情況 CD4; Homo sapiens

基因表達情況 interleukin 2, tumor necrosis factor alpha (TNF alpha), CD4; Homo sapiens

細胞保存方法：

（一）細胞凍存

1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液；

2. 取對數(shù)生長期的細胞，去除舊培養(yǎng)液，用PBS清洗。

3. 去除PBS，加入適量（覆蓋培養(yǎng)皿表面）把單層生長的細胞消化下來；

4. 離心1000rpm，5min；

5. 去除，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，計數(shù)，調(diào)節(jié)凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml～1×107/ml；

6. 將細胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml；

7. 在凍存管上標(biāo)明細胞的名稱，凍存時間及操作者；

8. 凍存：標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序為降溫速率-1～-2℃/ min；當(dāng)溫度達-25℃以下時，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內(nèi)。

HuT 78 (人T淋巴細胞白血病細胞)

注意事項：

1）、欲冷凍保存之細胞應(yīng)在生長良好且存活率高之狀態(tài)，約為80～90%致密度。冷凍前檢測細胞是否仍保有其性質(zhì)，應(yīng)在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產(chǎn)生。

2）、細胞在液氮中可長期凍存無，而不會影響細胞活力;在-70度可保存數(shù)月。

3）、注意冷凍保護劑之品質(zhì)。DMSO應(yīng)為試劑級等級，無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產(chǎn)品，如Sigma D-2650)，以5～10 ml小體積分裝，4 ℃避光保存，勿作多次解凍。Glycerol亦應(yīng)為試劑級等級，以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用，因長期儲存后對細胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液，可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細胞的損傷。緩慢逐滴加入細胞懸液是使細胞逐步適應(yīng)高滲，可降低細胞受損。DMSO可能引起部分白血病細胞株的分化，可換用10%甘油凍存。

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操作步驟：

1）、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養(yǎng)基，使細胞處于指數(shù)生長期。

2）、配制冷凍保存溶液(使用前配制)：另取一離心管，加入培養(yǎng)基、血清，逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度，即制成雙倍的凍存液，置于室溫下待用。

3）、離心收集培養(yǎng)之細胞，用加血清的培養(yǎng)基重懸起細胞，取少量細胞懸浮液(約0. 1 ml)計數(shù)細胞濃度及凍前存活率。

4）、取與細胞懸液等量的凍存液，緩慢逐滴加入細胞懸液，并晃動試管，制成細胞凍存懸液(DMSO后濃度為5～10%)，使細胞濃度為1～5×106cells/ ml，混合均勻，分裝于已標(biāo)示之冷凍保存管中，1～2 ml/vial，并取少量細胞懸浮液作污染檢測。嚴密封口后，注明細胞名稱、代數(shù)、日期。然后進行凍存。