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更新時(shí)間:2024-06-19 14:17:28瀏覽次數(shù):668次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 環(huán)保在線英文名稱 | Recombinant Cyclin Dependent Kinase 4 (CDK4) | 物種 | Homo sapiens (Human,人) |
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型號(hào) | CS-D432 | 性狀 | 凍干粉 |
人周期素依賴性激酶4(CDK4)重組蛋白
產(chǎn)品名稱:周期素依賴性激酶4(CDK4)重組蛋白
英文名稱:Recombinant Cyclin Dependent Kinase 4 (CDK4)
CMM3; PSK-J3; Cell division protein kinase 4
型號(hào):CS-D432
酶與激酶
腫瘤免疫
物種:Homo sapiens (Human,人)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細(xì)胞定位::細(xì)胞質(zhì)
預(yù)測分子量:33.5kDa
實(shí)際分子量:33kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Tyr6~Leu295 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點(diǎn):6.7
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格:10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1、樣本處理:
采樣、存儲(chǔ)和處理樣本要規(guī)范,避免凍融循環(huán)。防止樣本污染,保持樣本的純度。
2、樣本分離和制備:
使用合適的分離方法,如SDS-PAGE或液相色譜。保持儀器和試劑的干凈,防止污染。
3、樣本標(biāo)記和標(biāo)準(zhǔn)化:
選擇合適的蛋白質(zhì)標(biāo)記方法,確保標(biāo)記效率和穩(wěn)定性。
4、質(zhì)譜分析:
確保質(zhì)譜儀和其他相關(guān)設(shè)備的校準(zhǔn)和性能處于狀態(tài),并保持質(zhì)譜分析條件的一致
5、數(shù)據(jù)處理和分析:
峰提取、質(zhì)譜校準(zhǔn)和蛋白質(zhì)定量要仔細(xì)進(jìn)行,使用專業(yè)工具。使用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析數(shù)據(jù),進(jìn)行多重假設(shè)校正。
6、技術(shù)重復(fù)和質(zhì)量控制:
進(jìn)行技術(shù)重復(fù),包括陽性和陰性對照組。確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。
蛋白方法/步驟:
一、其中碳?xì)浔谎趸癁槎趸己退莩?,蛋白質(zhì)中的氮轉(zhuǎn)化為氨與硫酸結(jié)合生成硫酸氯在硫酸中,然后加堿蒸餾,使氨逸出,用硼酸吸收,再以硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定。根據(jù)酸的消耗量乘以換算系數(shù)為蛋白質(zhì)含量。筆者根據(jù)多年來操作經(jīng)驗(yàn)認(rèn)為,
在檢驗(yàn)過程中應(yīng)注意如下三個(gè)環(huán)節(jié)。一、樣品、試劑加入量的控制。
二、1.稱取試樣的多少取決于樣品中蛋白質(zhì)的高低。蛋白質(zhì)中含氮量較恒定,通常是通過測定食品中氮的含量來確定蛋白質(zhì)的含量。一般固體樣品稱取0.2-2.0g,半固體樣品稱取2—5g,液體樣品吸取10-20ml。樣品中含氮量低的可增加稱樣量。
三、2.硫酸的加入量,通常加20ml,但試樣量如超過5g時(shí),應(yīng)按每克試樣5ml的比例增加硫酸用量。否則試樣消化不造成結(jié)果偏低。3.消泡劑的加入。含脂肪或糖較多的食品在消化時(shí)產(chǎn)生大量泡沫,溢出瓶外,造成氮的損失,所以消化前可加入少量消泡齊lj。如:液體石蠟、硅消泡劑等。
四、4.催化劑的加入量要適宜硫酸銅是的催化劑,效果好,價(jià)格便宜,環(huán)境污染小,而且是蒸餾加堿時(shí)的指示劑。硫酸鉀可加快有機(jī)物的分解,使硫酸沸點(diǎn)從34.0℃提高到40.0℃以上,但加入量不能太大,否則溫度過高會(huì)使銨鹽分解而文——胡惠敏造成損失,除硫酸鉀外硫酸鈉也有同樣作用。5.難消化的樣品還可適當(dāng)加入少量過氧化氫,次氯酸鈉等氧化劑加速有機(jī)物氧化。
五、二、樣品消化處理。1.樣品一定要移入干燥的凱氏燒瓶中,否則樣品易粘在瓶壁上不易消化。加硫酸時(shí)應(yīng)將附在瓶壁上的粉末仔細(xì)洗至瓶中,使樣品全部消化。還有在消化時(shí)注意轉(zhuǎn)動(dòng)凱氏燒瓶,利用冷凝酸液將附在瓶壁上的碳粒沖下促進(jìn)消化。2.樣品與試劑加入搖勻后瓶口應(yīng)放一小漏斗,將瓶傾斜45。角斜至有小孔的石棉網(wǎng)上,小心加熱,避免噴濺。待瓶內(nèi)試樣全部碳化,泡沫停止后,再加強(qiáng)火力,并保持瓶內(nèi)液體微沸,至液體呈澄清透明的藍(lán)綠色后再加熱半小時(shí),樣品即消化。三、蒸餾過程中條件的控制。
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