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英文名稱 | Recombinant High Temperature Requirement Factor A4 | 物種 | Homo sapiens (Human,人) |
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型號 | CS-D022 | 性狀 | 凍干粉 |
人高溫需求因子A4(HTRA4)重組蛋白
產品名稱:高溫需求因子A4(HTRA4)重組蛋白
英文名稱:Recombinant High Temperature Requirement Factor A4 (HTRA4)
HtrA Serine Peptidase 4
型號:CS-D022
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
來源:原核表達
宿主E.coli
內毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::分泌
預測分子量:20.9kDa
實際分子量:21kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽:Gly202~Leu362 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點:4.5
應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格:10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白方法/步驟:
一、其中碳氫被氧化為二氧化碳和水逸出,蛋白質中的氮轉化為氨與硫酸結合生成硫酸氯在硫酸中,然后加堿蒸餾,使氨逸出,用硼酸吸收,再以硫酸或鹽酸標準溶液滴定。根據(jù)酸的消耗量乘以換算系數(shù)為蛋白質含量。筆者根據(jù)多年來操作經驗認為,
在檢驗過程中應注意如下三個環(huán)節(jié)。一、樣品、試劑加入量的控制。
二、1.稱取試樣的多少取決于樣品中蛋白質的高低。蛋白質中含氮量較恒定,通常是通過測定食品中氮的含量來確定蛋白質的含量。一般固體樣品稱取0.2-2.0g,半固體樣品稱取2—5g,液體樣品吸取10-20ml。樣品中含氮量低的可增加稱樣量。
三、2.硫酸的加入量,通常加20ml,但試樣量如超過5g時,應按每克試樣5ml的比例增加硫酸用量。否則試樣消化不造成結果偏低。3.消泡劑的加入。含脂肪或糖較多的食品在消化時產生大量泡沫,溢出瓶外,造成氮的損失,所以消化前可加入少量消泡齊lj。如:液體石蠟、硅消泡劑等。
四、4.催化劑的加入量要適宜硫酸銅是的催化劑,效果好,價格便宜,環(huán)境污染小,而且是蒸餾加堿時的指示劑。硫酸鉀可加快有機物的分解,使硫酸沸點從34.0℃提高到40.0℃以上,但加入量不能太大,否則溫度過高會使銨鹽分解而文——胡惠敏造成損失,除硫酸鉀外硫酸鈉也有同樣作用。5.難消化的樣品還可適當加入少量過氧化氫,次氯酸鈉等氧化劑加速有機物氧化。
五、二、樣品消化處理。1.樣品一定要移入干燥的凱氏燒瓶中,否則樣品易粘在瓶壁上不易消化。加硫酸時應將附在瓶壁上的粉末仔細洗至瓶中,使樣品全部消化。還有在消化時注意轉動凱氏燒瓶,利用冷凝酸液將附在瓶壁上的碳粒沖下促進消化。2.樣品與試劑加入搖勻后瓶口應放一小漏斗,將瓶傾斜45。角斜至有小孔的石棉網上,小心加熱,避免噴濺。待瓶內試樣全部碳化,泡沫停止后,再加強火力,并保持瓶內液體微沸,至液體呈澄清透明的藍綠色后再加熱半小時,樣品即消化。三、蒸餾過程中條件的控制。
蛋白實驗注意事項:
1、樣本處理:
采樣、存儲和處理樣本要規(guī)范,避免凍融循環(huán)。防止樣本污染,保持樣本的純度。
2、樣本分離和制備:
使用合適的分離方法,如SDS-PAGE或液相色譜。保持儀器和試劑的干凈,防止污染。
3、樣本標記和標準化:
選擇合適的蛋白質標記方法,確保標記效率和穩(wěn)定性。
4、質譜分析:
確保質譜儀和其他相關設備的校準和性能處于狀態(tài),并保持質譜分析條件的一致
5、數(shù)據(jù)處理和分析:
峰提取、質譜校準和蛋白質定量要仔細進行,使用專業(yè)工具。使用統(tǒng)計學方法分析數(shù)據(jù),進行多重假設校正。
6、技術重復和質量控制:
進行技術重復,包括陽性和陰性對照組。確保實驗的準確性和可重復性。
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