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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>科研細(xì)胞>>原代細(xì)胞>> 大鼠牙周膜成纖維細(xì)胞
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更新時(shí)間:2024-07-26 13:40:32瀏覽次數(shù):295次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 環(huán)保在線規(guī)格 | 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 組織來源 | 牙周膜組織 |
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貨號(hào) | CS-X3264 | 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
產(chǎn)品信息:
貨號(hào) | CS-X3264 | 組織來源 | 牙周膜組織 |
傳代特性 | 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài) | 培養(yǎng)基 | 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
培養(yǎng)條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5% | 換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
商品介紹:
產(chǎn)品名稱:大鼠牙周膜成纖維細(xì)胞 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介: 大鼠牙周膜成纖維細(xì)胞分離自牙周膜組織;牙周膜(牙周韌帶、牙周間隙)是由致密結(jié)締組織所構(gòu)成。多數(shù)纖維排列成束,纖維的一端埋于牙骨質(zhì)內(nèi),另一端則埋于牙槽窩骨壁里,使牙齒固位于牙槽窩內(nèi);牙周膜內(nèi)有神經(jīng)、血管、淋巴和上皮細(xì)胞等。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的牙周膜成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長(zhǎng),不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長(zhǎng),平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。牙周膜成纖維細(xì)胞(PLFs)作為牙周膜的主體細(xì)胞,是牙周膜主要的間質(zhì)細(xì)胞,它不僅具有合成膠原、基質(zhì)、彈力纖維和糖蛋白的功能,還有吸收膠原吞噬異物的能力,還參與了牙周組織的病變、修復(fù)及再生過程?,F(xiàn)在,利用牙周膜細(xì)胞建立體外模型,已經(jīng)成為有關(guān)員研究牙周組織疾病的重要手段。 5.方法簡(jiǎn)介: 公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠牙周膜成纖維細(xì)胞采用膠原酶-yi蛋白酶聯(lián)合消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測(cè): 公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠牙周膜成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性 貼壁 細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣 傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳 消化液 0.25%yi蛋白酶 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
細(xì)胞保存方法:
(一)細(xì)胞凍存
1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;
2. 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,去除舊培養(yǎng)液,用PBS清洗。
3. 去除PBS,加入適量(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長(zhǎng)的細(xì)胞消化下來;
4. 離心1000rpm,5min;
5. 去除,加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,計(jì)數(shù),調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的最終密度為5×106/ml~1×107/ml;
6. 將細(xì)胞分裝入凍存管中,每管1~1.5 ml;
7. 在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱,凍存時(shí)間及操作者;
8. 凍存:標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1~-2℃/ min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí),可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時(shí),則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中過夜,取出凍存管,移入液氮容器內(nèi)。
注意事項(xiàng):
1)、欲冷凍保存之細(xì)胞應(yīng)在生長(zhǎng)良好且存活率高之狀態(tài),約為80~90%致密度。冷凍前檢測(cè)細(xì)胞是否仍保有其性質(zhì),應(yīng)在冷凍保存前一至二日測(cè)試是否有抗體之產(chǎn)生。
2)、細(xì)胞在液氮中可長(zhǎng)期凍存無,而不會(huì)影響細(xì)胞活力;在-70度可保存數(shù)月。
3)、注意冷凍保護(hù)劑之品質(zhì)。DMSO應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí),無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產(chǎn)品,如Sigma D-2650),以5~10 ml小體積分裝,4 ℃避光保存,勿作多次解凍。Glycerol亦應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí),以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用,因長(zhǎng)期儲(chǔ)存后對(duì)細(xì)胞會(huì)有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液,可避免DMSO直接加入時(shí)釋放的熱量對(duì)細(xì)胞的損傷。緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液是使細(xì)胞逐步適應(yīng)高滲,可降低細(xì)胞受損。DMSO可能引起部分白血病細(xì)胞株的分化,可換用10%甘油凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠腸神經(jīng)嵴干細(xì)胞 | 人分泌粒蛋白1(嗜鉻粒蛋白B)(CHGB/SCG1)檢測(cè)試劑盒 |
CCC-SMC-1 (兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞) | 人二磷suan尿核苷葡糖醛suan基轉(zhuǎn)移mei2家族肽B4(UGT2B4)檢測(cè)試劑盒 |
MA-104 [MA 104; MA104] (非洲綠猴胚胎腎細(xì)胞) | 人催乳su誘導(dǎo)蛋白(PIP)試劑盒ELISA |
PC-12 (低分化) (大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(低分化)) | 人XC趨化因子受體1(XCR1)ELISA Kit |
PC-12 (高分化) (大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(高分化)) | 豬生殖與呼吸綜合癥病毒美洲株RT-PCR試劑盒 |
PED (豬內(nèi)皮細(xì)胞) | 弗氏檸檬suan桿菌PCR檢測(cè)試劑盒 |
Ramos [RA 1] (人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞) | 雞毒支原體(MG)核suan檢測(cè)試劑盒 |
Reh (人急性非B非T淋巴細(xì)胞白血病) | 肺炎支原體熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒(染料法) |
SW837 (人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞) | 馬媾疫錐蟲PCR試劑盒 |
TE671 subline No.2 (人橫紋肌肉瘤細(xì)胞) | 禽傳染性支氣管炎病毒通用RT-PCR試劑盒 |
P69 (人前列腺上皮細(xì)胞) | 禽呼腸孤病毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
CV-1 [Part of the Wistar Special Collection] (非洲綠猴腎細(xì)胞) | 馬鏈球菌馬亞種PCR試劑盒 |
Mv.1.Lu [NBL-7; Mv1Lu] (貂肺上皮細(xì)胞) | 大鼠牙周膜成纖維細(xì)胞馬爾太蟲通用PCR試劑盒 |
VERO C1008 [Vero E6] (非洲綠猴腎細(xì)胞) | 禽傳染性支氣管炎病毒793型PCR檢測(cè)試劑盒 |
MNNG/HOS Cl #5 [R-1059-D] (人骨肉瘤細(xì)胞) | 豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)核suan檢測(cè)試劑盒 |
操作步驟:
1)、冷凍前24-48小時(shí)更換半量或全量培養(yǎng)基,使細(xì)胞處于指數(shù)生長(zhǎng)期。
2)、配制冷凍保存溶液(使用前配制):另取一離心管,加入培養(yǎng)基、血清,逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度,即制成雙倍的凍存液,置于室溫下待用。
3)、離心收集培養(yǎng)之細(xì)胞,用加血清的培養(yǎng)基重懸起細(xì)胞,取少量細(xì)胞懸浮液(約0. 1 ml)計(jì)數(shù)細(xì)胞濃度及凍前存活率。
4)、取與細(xì)胞懸液等量的凍存液,緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液,并晃動(dòng)試管,制成細(xì)胞凍存懸液(DMSO后濃度為5~10%),使細(xì)胞濃度為1~5×106cells/ ml,混合均勻,分裝于已標(biāo)示之冷凍保存管中,1~2 ml/vial,并取少量細(xì)胞懸浮液作污染檢測(cè)。嚴(yán)密封口后,注明細(xì)胞名稱、代數(shù)、日期。然后進(jìn)行凍存。
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