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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>科研細(xì)胞>>原代細(xì)胞>> 大鼠胰島β細(xì)胞
貨號 | CS-X3266 | 規(guī)格 | 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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生長特性 | 貼壁 | 組織來源 | 胰腺組織 |
細(xì)胞保存方法:
(一)細(xì)胞凍存
1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;
2. 取對數(shù)生長期的細(xì)胞,去除舊培養(yǎng)液,用PBS清洗。
3. 去除PBS,加入適量(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長的細(xì)胞消化下來;
4. 離心1000rpm,5min;
5. 去除,加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,計數(shù),調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的最終密度為5×106/ml~1×107/ml;
6. 將細(xì)胞分裝入凍存管中,每管1~1.5 ml;
7. 在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱,凍存時間及操作者;
8. 凍存:標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/ min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時,則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中過夜,取出凍存管,移入液氮容器內(nèi)。
產(chǎn)品信息:
貨號 | CS-X3266 | 組織來源 | 胰腺組織 |
傳代特性 | 可傳1-2代 | 培養(yǎng)基 | 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 |
細(xì)胞形態(tài) | 梭形、多角形 | 生長特性 | 貼壁 |
培養(yǎng)條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5% | 換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
商品介紹:
產(chǎn)品名稱:大鼠胰島β細(xì)胞 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介: 大鼠胰島β細(xì)胞分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳suan氫鈉、yi蛋白酶原、脂肪酶、淀粉mei等。胰液通過胰腺管排入十二指腸,有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。內(nèi)分泌腺由大小不同的細(xì)胞團(tuán)──胰島所組成,胰島主要由4種細(xì)胞組成:α細(xì)胞、β細(xì)胞、γ細(xì)胞及PP細(xì)胞。α細(xì)胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β細(xì)胞分泌胰島素,降低血糖;γ細(xì)胞分泌生長抑su,以旁分泌的方式抑制α、β細(xì)胞的分泌;PP細(xì)胞分泌胰多肽,抑制胃腸運(yùn)動、胰液分泌和膽囊收縮。胰島β細(xì)胞,即胰島B細(xì)胞,是胰島細(xì)胞的一種,屬內(nèi)分泌細(xì)胞的一種,能分泌胰島素,與胰島α細(xì)胞分泌的胰高血糖素一起起到調(diào)節(jié)血糖的作用。胰島B細(xì)胞功能受損、胰島素分泌絕對或相對不足(胰島素抵抗),會使血糖升高,從而引發(fā)糖尿病。而胰島B細(xì)胞癌變會生成胰島素瘤,引起惡性血糖降低癥狀。 5.方法簡介: 公司實驗室分離的大鼠胰島β細(xì)胞采用先用膠原酶消化分離得到胰島、再用yi酶逐級消化胰島制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測: 公司實驗室分離的大鼠胰島β細(xì)胞經(jīng)Insulin含量檢測,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形 傳代特性 可傳1-2代 消化液 0.25%yi蛋白酶 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
操作步驟:
1)、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養(yǎng)基,使細(xì)胞處于指數(shù)生長期。
2)、配制冷凍保存溶液(使用前配制):另取一離心管,加入培養(yǎng)基、血清,逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度,即制成雙倍的凍存液,置于室溫下待用。
3)、離心收集培養(yǎng)之細(xì)胞,用加血清的培養(yǎng)基重懸起細(xì)胞,取少量細(xì)胞懸浮液(約0. 1 ml)計數(shù)細(xì)胞濃度及凍前存活率。
4)、取與細(xì)胞懸液等量的凍存液,緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液,并晃動試管,制成細(xì)胞凍存懸液(DMSO后濃度為5~10%),使細(xì)胞濃度為1~5×106cells/ ml,混合均勻,分裝于已標(biāo)示之冷凍保存管中,1~2 ml/vial,并取少量細(xì)胞懸浮液作污染檢測。嚴(yán)密封口后,注明細(xì)胞名稱、代數(shù)、日期。然后進(jìn)行凍存。
注意事項:
1)、欲冷凍保存之細(xì)胞應(yīng)在生長良好且存活率高之狀態(tài),約為80~90%致密度。冷凍前檢測細(xì)胞是否仍保有其性質(zhì),應(yīng)在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產(chǎn)生。
2)、細(xì)胞在液氮中可長期凍存無,而不會影響細(xì)胞活力;在-70度可保存數(shù)月。
3)、注意冷凍保護(hù)劑之品質(zhì)。DMSO應(yīng)為試劑級等級,無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產(chǎn)品,如Sigma D-2650),以5~10 ml小體積分裝,4 ℃避光保存,勿作多次解凍。Glycerol亦應(yīng)為試劑級等級,以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用,因長期儲存后對細(xì)胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液,可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細(xì)胞的損傷。緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液是使細(xì)胞逐步適應(yīng)高滲,可降低細(xì)胞受損。DMSO可能引起部分白血病細(xì)胞株的分化,可換用10%甘油凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠骨細(xì)胞 | 人肺炎衣原體抗原(Cpn)ELISA檢測試劑盒 |
PT67 (逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞) | 人腺苷三磷suan結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體G2(ABCG2)檢測試劑盒 |
Tb 1 Lu (蝙蝠肺細(xì)胞) | 人催乳su釋放激su(PRH)檢測試劑盒 |
NCI-H929(人骨髓瘤細(xì)胞) | 人α/β干擾su受體(IFN-α/βR) 檢測試劑盒 |
U266 (人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞) | 犬RT-PCR試劑盒 |
JVM-2 (EB病毒感染的人外周淋巴細(xì)胞) | 卡氏枝孢霉PCR檢測試劑盒 |
M2-10B4 (小鼠骨髓纖維原細(xì)胞) | 禽傳染性法氏囊病毒(IBDV)核suan檢測試劑盒 |
SW48 (人結(jié)腸腺癌細(xì)胞) | 副雞嗜血桿菌PCR檢測試劑盒 |
NCI-H441 (人肺腺癌細(xì)胞) | 馬RT-PCR試劑盒 |
Farage (人B淋巴瘤細(xì)胞) | 禽傳染性支氣管炎病毒流行株RT-PCR試劑盒 |
MC/CAR (人外周血淋巴細(xì)胞) | 禽副粘病毒型PCR檢測試劑盒 |
MPC-83 (小鼠胰腺腺泡細(xì)胞) | 馬流產(chǎn)沙門氏菌PCR檢測試劑盒 |
HA-VSMC (人主動脈血管平滑肌細(xì)胞) | 大鼠胰島β細(xì)胞馬媾疫錐蟲PCR試劑盒 |
MCF 10A (人正常乳腺上皮細(xì)胞) | 禽傳染性喉氣管炎病毒(AiLTV)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法) |
SGC-7901-GFP (人胃腺癌細(xì)胞(綠色熒光)) | 日本乙型腦炎病毒(JEV)核suan檢測試劑盒 |
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