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當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>科研細胞>>原代細胞>> 大鼠心臟纖維原細胞
規(guī)格 | 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 組織來源 | 心臟組織 |
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貨號 | CS-X3254 | 細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 |
產(chǎn)品信息:
貨號 | CS-X3254 | 組織來源 | 心臟組織 |
傳代特性 | 可傳3代左右 | 培養(yǎng)基 | 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
培養(yǎng)條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5% | 換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
商品介紹:
產(chǎn)品名稱:大鼠心臟纖維原細胞 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介: 大鼠心臟纖維原細胞分離自心臟組織;心臟由心肌細胞和非心肌細胞組成,非心肌細胞占細胞總數(shù)的70%,其中90%以上的非心肌細胞由心肌成纖維細胞組成。纖維細胞是機能不活躍的成纖維細胞。胞體呈梭形,胞質較少,弱嗜酸性,胞核小,染色深。電鏡下可見,細胞中粗面內(nèi)質網(wǎng)和高爾基體均不發(fā)達。當組織受損時,纖維細胞可轉化為成纖維細胞而參與修復過程。纖維細胞和成纖維細胞是處于不同功能狀態(tài)的同一種細胞,如在組織損傷后的修復過程中,纖維細胞可轉化為功能活躍的成纖維細胞。纖維細胞較小,呈多角形,胞質較少,弱嗜酸性,胞核亦較小,染色較深,電鏡下粗面內(nèi)質網(wǎng)較少,高爾基復合體不發(fā)達。成纖維細胞較大,呈星形或梭形,有突起,細胞核呈卵圓形,染色質稀疏,染色淡,核仁明顯,胞質較多。成纖維細胞能合成和分泌膠原蛋白、彈性蛋白和蛋白多糖,形成膠原纖維、彈性纖維和網(wǎng)狀纖維以及基質成分。心肌成纖維細胞主要功能為對心肌細胞起結構支持作用并負責細胞基質外的合成,當心肌損傷時能產(chǎn)生旁分泌生長因子。心肌成纖維細胞是心臟結締組織中常見的細胞,可合成和分泌膠原纖維、彈性纖維、網(wǎng)狀纖維及有機基質,并且在外傷等因素刺激下,部分纖維細胞可重新轉變?yōu)橛字傻某衫w維細胞,其功能活動也得以恢復,參與組織損傷后的修復。因此,對心肌成纖維細胞的生理學研究成為現(xiàn)代心血管領域研究的一個重點。 5.方法簡介: 公司實驗室分離的大鼠心臟纖維原細胞采用膠原酶消化結合差速貼壁法制備而來制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 公司實驗室分離的大鼠心臟纖維原細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態(tài) 成纖維細胞樣 傳代特性 可傳3代左右 消化液 0.25%yi蛋白酶 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
細胞保存方法:
(一)細胞凍存
1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;
2. 取對數(shù)生長期的細胞,去除舊培養(yǎng)液,用PBS清洗。
3. 去除PBS,加入適量(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長的細胞消化下來;
4. 離心1000rpm,5min;
5. 去除,加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,計數(shù),調(diào)節(jié)凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml~1×107/ml;
6. 將細胞分裝入凍存管中,每管1~1.5 ml;
7. 在凍存管上標明細胞的名稱,凍存時間及操作者;
8. 凍存:標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/ min;當溫度達-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時,則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中過夜,取出凍存管,移入液氮容器內(nèi)。
注意事項:
1)、欲冷凍保存之細胞應在生長良好且存活率高之狀態(tài),約為80~90%致密度。冷凍前檢測細胞是否仍保有其性質,應在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產(chǎn)生。
2)、細胞在液氮中可長期凍存無,而不會影響細胞活力;在-70度可保存數(shù)月。
3)、注意冷凍保護劑之品質。DMSO應為試劑級等級,無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產(chǎn)品,如Sigma D-2650),以5~10 ml小體積分裝,4 ℃避光保存,勿作多次解凍。Glycerol亦應為試劑級等級,以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液,可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細胞的損傷。緩慢逐滴加入細胞懸液是使細胞逐步適應高滲,可降低細胞受損。DMSO可能引起部分白血病細胞株的分化,可換用10%甘油凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人外周血淋巴細胞 | 人附睪蛋白4(HE4)ELISA檢測試劑盒 |
Detroit 562 (人咽頭癌胸水轉移細胞) | 人混合系列蛋白激mei樣結構域(MLKL)檢測試劑盒 |
CTLL-2 (小鼠T細胞) | 人單純皰疹病毒Ⅱ型抗體IgM(HSVⅡ-Ab)檢測試劑盒 |
Dami (人巨核細胞白血病細胞) | 人T細胞活化連接蛋白(LAT)檢測試劑盒 |
E.G7-OVA (小鼠T淋巴瘤細胞) | 擬無枝菌suan菌通用PCR試劑盒 |
EB-3 (人Burkitt's淋巴瘤細胞) | 鸚鵡熱衣原體PCR檢測試劑盒 |
EBTr [NBL-4] (牛胚氣管細胞) | 轉基因植物Bt基因PCR檢測試劑盒 |
FC33 (人胚胎腎細胞(Asp-2基因修飾)) | 動物源性成分(18S)PCR檢測試劑盒 |
FO (小鼠骨髓瘤細胞) | 馬動脈炎病毒RT-PCR試劑盒 |
G1 (發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細胞) | 禽副粘病毒3型RT-PCR試劑盒 |
G-401 (人腎癌Wilms細胞) | 病毒H5/H7/H9亞型(AIV-H5/H7/H9)核suan檢測試劑盒 |
H22 (小鼠肝癌細胞) | 馬類圓線蟲PCR檢測試劑盒 |
GH3 (大鼠垂體瘤細胞) | 大鼠心臟纖維原細胞馬傳染性貧血(EIAV)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法) |
H-4-II-E-C3 [H4-II-E-C3] (大鼠肝癌細胞) | 禽肺病毒PCR檢測試劑盒 |
HA (人羊膜細胞) | 豬多殺性巴氏桿菌(SPA)核suan檢測試劑盒 |
操作步驟:
1)、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養(yǎng)基,使細胞處于指數(shù)生長期。
2)、配制冷凍保存溶液(使用前配制):另取一離心管,加入培養(yǎng)基、血清,逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度,即制成雙倍的凍存液,置于室溫下待用。
3)、離心收集培養(yǎng)之細胞,用加血清的培養(yǎng)基重懸起細胞,取少量細胞懸浮液(約0. 1 ml)計數(shù)細胞濃度及凍前存活率。
4)、取與細胞懸液等量的凍存液,緩慢逐滴加入細胞懸液,并晃動試管,制成細胞凍存懸液(DMSO后濃度為5~10%),使細胞濃度為1~5×106cells/ ml,混合均勻,分裝于已標示之冷凍保存管中,1~2 ml/vial,并取少量細胞懸浮液作污染檢測。嚴密封口后,注明細胞名稱、代數(shù)、日期。然后進行凍存。
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