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規(guī)格	5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶	組織來源	呼吸道
貨號	CS-X3214	細胞形態(tài)	上皮細胞樣

產(chǎn)品信息：

貨號	CS-X3214	組織來源	呼吸道
傳代特性	可傳1-2代	培養(yǎng)基	含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
細胞形態(tài)	上皮細胞樣	生長特性	貼壁
培養(yǎng)條件		換液頻率	每2-3天換液一次

小鼠呼吸道上皮細胞

商品介紹：

產(chǎn)品名稱：小鼠呼吸道上皮細胞
2.組織來源：呼吸道

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

小鼠呼吸道上皮細胞分離自呼吸道；呼吸道是肺呼吸時氣流所經(jīng)過的通道，有肺脊椎動物的呼吸道分上、下兩部：鼻、咽和喉合稱上呼吸道。氣管及其以后一分再分的管道，合稱為下呼吸道，或稱為氣管樹。氣管樹是隨著動物的進化逐漸復雜化的。整個呼吸道內(nèi)表面都分布有分泌液和纖毛（鼻孔、咽后壁和聲帶黏膜除外），它能溫暖（或冷卻）、濕潤和凈化吸入的空氣，對于呼吸器官和機體有著保護作用。呼吸道以骨或軟骨做支架，其內(nèi)表面覆蓋著黏膜，黏膜內(nèi)分布著豐富的毛細血管。呼吸道上皮細胞屬于假復層纖毛柱狀上皮，分布于呼吸道的內(nèi)表面，主要由柱狀，杯形，梭形和錐形等不同形狀細胞組成。看上去像復層上皮，但實際上所有細胞底部均附于基膜上，屬單層上皮，故稱假復層柱狀上皮，上皮表面有纖毛，杯狀細胞可分泌粘液，包裹著大量細菌，借助纖毛不斷擺動將其慢慢移動至出消化道。

5.方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠呼吸道上皮細胞采用yi蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的小鼠呼吸道上皮細胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性可傳1-2代

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞保存方法：

（一）細胞凍存

1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液；

2. 取對數(shù)生長期的細胞，去除舊培養(yǎng)液，用PBS清洗。

3. 去除PBS，加入適量（覆蓋培養(yǎng)皿表面）把單層生長的細胞消化下來；

4. 離心1000rpm，5min；

5. 去除，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，計數(shù)，調(diào)節(jié)凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml～1×107/ml；

6. 將細胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml；

7. 在凍存管上標明細胞的名稱，凍存時間及操作者；

8. 凍存：標準的凍存程序為降溫速率-1～-2℃/ min；當溫度達-25℃以下時，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內(nèi)。

小鼠呼吸道上皮細胞

注意事項：

1）、欲冷凍保存之細胞應在生長良好且存活率高之狀態(tài)，約為80～90%致密度。冷凍前檢測細胞是否仍保有其性質(zhì)，應在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產(chǎn)生。

2）、細胞在液氮中可長期凍存無，而不會影響細胞活力;在-70度可保存數(shù)月。

3）、注意冷凍保護劑之品質(zhì)。DMSO應為試劑級等級，無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產(chǎn)品，如Sigma D-2650)，以5～10 ml小體積分裝，4 ℃避光保存，勿作多次解凍。Glycerol亦應為試劑級等級，以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用，因長期儲存后對細胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液，可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細胞的損傷。緩慢逐滴加入細胞懸液是使細胞逐步適應高滲，可降低細胞受損。DMSO可能引起部分白血病細胞株的分化，可換用10%甘油凍存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠支氣管平滑肌細胞	人肝細胞核因子1β(HNF-1B)試劑盒ELISA
大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞	人C反應蛋白(CRP)試劑盒elisa
大鼠外周血淋巴細胞	人抵抗su樣分子β(RELM-β)檢測試劑盒
大鼠小腸平滑肌細胞	人Salusin-α 試劑盒 ELISA
大鼠心臟纖維原細胞	豬輪狀病毒通用RT-PCR試劑盒
大鼠牙乳頭細胞	百部染料法PCR鑒定試劑盒
大鼠胰腺導管上皮細胞	玉米內(nèi)源基因PCR檢測試劑盒
大鼠支氣管成纖維細胞	傳染性非典型肺炎病毒PCR檢測試劑盒
大鼠主動脈外膜成纖維細胞	騾源性成分PCR試劑盒
大鼠棕色脂肪干細胞	禽腺病毒A型PCR試劑盒
雞外周血單核細胞	禽偏肺病毒（aMPV）核suan檢測試劑盒
人肺大靜脈內(nèi)皮細胞	麻風分枝桿菌PCR檢測試劑盒
人腸動脈內(nèi)皮細胞	小鼠呼吸道上皮細胞輪狀病毒PCR檢測試劑盒
人肝動脈平滑肌細胞	病毒N9亞型(AIV-N9)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法)
人骨髓單個核細胞	豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒PCR檢測試劑盒

操作步驟：

1）、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養(yǎng)基，使細胞處于指數(shù)生長期。

2）、配制冷凍保存溶液(使用前配制)：另取一離心管，加入培養(yǎng)基、血清，逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度，即制成雙倍的凍存液，置于室溫下待用。

3）、離心收集培養(yǎng)之細胞，用加血清的培養(yǎng)基重懸起細胞，取少量細胞懸浮液(約0. 1 ml)計數(shù)細胞濃度及凍前存活率。

4）、取與細胞懸液等量的凍存液，緩慢逐滴加入細胞懸液，并晃動試管，制成細胞凍存懸液(DMSO后濃度為5～10%)，使細胞濃度為1～5×106cells/ ml，混合均勻，分裝于已標示之冷凍保存管中，1～2 ml/vial，并取少量細胞懸浮液作污染檢測。嚴密封口后，注明細胞名稱、代數(shù)、日期。然后進行凍存。