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規(guī)格	5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶	組織來源	骨髓
貨號	CS-X3412	細(xì)胞形態(tài)	圓形

細(xì)胞保存方法：

（一）細(xì)胞凍存

1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液；

2. 取對數(shù)生長期的細(xì)胞，去除舊培養(yǎng)液，用PBS清洗。

3. 去除PBS，加入適量（覆蓋培養(yǎng)皿表面）把單層生長的細(xì)胞消化下來；

4. 離心1000rpm，5min；

5. 去除，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，計數(shù)，調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的最終密度為5×106/ml～1×107/ml；

6. 將細(xì)胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml；

7. 在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱，凍存時間及操作者；

8. 凍存：標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1～-2℃/ min；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內(nèi)。

產(chǎn)品信息：

貨號	CS-X3412	組織來源	骨髓
傳代特性	不增殖；不傳代	培養(yǎng)基	含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
細(xì)胞形態(tài)	圓形	生長特性	半貼壁半懸浮
培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；CO2，5%	換液頻率	每2-3天換液一次

商品介紹：

產(chǎn)品名稱：小鼠骨髓單個核細(xì)胞
2.組織來源：骨髓

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介：

小鼠骨髓單個核細(xì)胞分離自骨髓；骨髓是機(jī)體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用，白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細(xì)菌、病毒等；某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細(xì)胞增多，相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓單個核細(xì)胞是骨髓中具有單個核的細(xì)胞，包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。注意這里是（mononuclear cell）單個核細(xì)胞，而不是（Monocyte）單核細(xì)胞。單個核細(xì)胞的體積、形態(tài)和比重與骨髓其他細(xì)胞不同，利用一定比例聚蔗糖和泛影鈉形成的等滲溶液作密度梯度離心，使一定密度的細(xì)胞按相應(yīng)密度梯度分布，可將各種血細(xì)胞與單個核細(xì)胞分離。

5.方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨髓單個核細(xì)胞采用取骨髓、通過密度梯度離心法制備而來制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨髓單個核細(xì)胞經(jīng)過檢測，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性半貼壁半懸浮

細(xì)胞形態(tài) 圓形

傳代特性不增殖；不傳代

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠骨髓單個核細(xì)胞

操作步驟：

1）、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養(yǎng)基，使細(xì)胞處于指數(shù)生長期。

2）、配制冷凍保存溶液(使用前配制)：另取一離心管，加入培養(yǎng)基、血清，逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度，即制成雙倍的凍存液，置于室溫下待用。

3）、離心收集培養(yǎng)之細(xì)胞，用加血清的培養(yǎng)基重懸起細(xì)胞，取少量細(xì)胞懸浮液(約0. 1 ml)計數(shù)細(xì)胞濃度及凍前存活率。

4）、取與細(xì)胞懸液等量的凍存液，緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液，并晃動試管，制成細(xì)胞凍存懸液(DMSO后濃度為5～10%)，使細(xì)胞濃度為1～5×106cells/ ml，混合均勻，分裝于已標(biāo)示之冷凍保存管中，1～2 ml/vial，并取少量細(xì)胞懸浮液作污染檢測。嚴(yán)密封口后，注明細(xì)胞名稱、代數(shù)、日期。然后進(jìn)行凍存。

注意事項(xiàng)：

1）、欲冷凍保存之細(xì)胞應(yīng)在生長良好且存活率高之狀態(tài)，約為80～90%致密度。冷凍前檢測細(xì)胞是否仍保有其性質(zhì)，應(yīng)在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產(chǎn)生。

2）、細(xì)胞在液氮中可長期凍存無，而不會影響細(xì)胞活力;在-70度可保存數(shù)月。

3）、注意冷凍保護(hù)劑之品質(zhì)。DMSO應(yīng)為試劑級等級，無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產(chǎn)品，如Sigma D-2650)，以5～10 ml小體積分裝，4 ℃避光保存，勿作多次解凍。Glycerol亦應(yīng)為試劑級等級，以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用，因長期儲存后對細(xì)胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液，可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細(xì)胞的損傷。緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液是使細(xì)胞逐步適應(yīng)高滲，可降低細(xì)胞受損。DMSO可能引起部分白血病細(xì)胞株的分化，可換用10%甘油凍存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

A-427 (人肺癌細(xì)胞)	人并殖吸蟲抗體(IgG)檢測試劑盒
人子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞	人因子Ⅶ(FⅦ)檢測試劑盒
人子宮平滑肌細(xì)胞	人β-肌動蛋白(β-actin)試劑盒ELISA
兔腸動脈內(nèi)皮細(xì)胞	人白介su16(IL-16)ELISA檢測試劑盒
兔成骨細(xì)胞	剛地弓形蟲PCR試劑盒
兔肺成纖維細(xì)胞	屎腸球菌PCR檢測試劑盒
兔肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞	豬圓環(huán)病毒/偽狂犬病毒(PCV/PRV)核suan檢測試劑盒
兔肺動脈成纖維細(xì)胞	諾沃克病毒PCR檢測試劑盒
兔肺泡巨噬細(xì)胞	綿羊附紅細(xì)胞體（綿羊嗜血支原體）PCR試劑盒
兔肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞	牛眼莫拉氏菌PCR試劑盒
兔腹腔巨噬細(xì)胞	牛皮蠅蛆PCR檢測試劑盒
兔骨骼肌細(xì)胞	莫佩亞病毒PCR檢測試劑盒
兔肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞	小鼠骨髓單個核細(xì)胞綿羊皰疹病毒2型PCR試劑盒
兔骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞	牛皰疹病毒通用PCR試劑盒
兔骨髓單核細(xì)胞	豬藍(lán)耳病毒經(jīng)典型/豬藍(lán)耳病毒NADC株（PRRSV-C/PRRSV-NADC）核suan檢測試劑盒