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規(guī)格	5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶	組織來源	胃組織
貨號	CS-X3301	細胞形態(tài)	成纖維細胞樣

產品信息：

貨號	CS-X3301	組織來源	胃組織
傳代特性	可傳5代左右；3代以內狀態(tài)	培養(yǎng)基	含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
細胞形態(tài)	成纖維細胞樣	生長特性	貼壁
培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；CO2，5%	換液頻率	每2-3天換液一次

大鼠胃平滑肌細胞

商品介紹：

產品名稱：大鼠胃平滑肌細胞
2.組織來源：胃組織

3.產品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

大鼠胃平滑肌細胞分離自胃組織；胃柔軟，活體呈橘紅色。胃空虛時形成許多皺襞，充盈時變平坦。胃壁由粘膜、粘膜下膜、肌膜和漿膜四層構成。粘膜上皮為柱狀上皮。上皮向粘膜深部下陷構成大量腺體（胃底腺、賁門腺、幽門腺），它們的分泌物混合形成胃液，對食物進行化學性消化。粘膜在幽門處由于覆蓋幽門括約肌的表面而形成環(huán)狀的皺襞叫幽門瓣。胃肌膜由三層平滑肌構成，外層縱形，中層環(huán)形，內層斜行，其中環(huán)形肌發(fā)達，在幽門處特別增厚形成幽門括約肌。胃平滑肌細胞源自胃的平滑肌層，細胞通過緊密連接，進行同步性運動，完成肌肉的舒縮活動，以推動食物前進，完成對食物的機械性消化，并促進化學性消化和吸收。胃平滑肌具有肌組織的共同特性，如興奮、自律性、傳導性和收縮性，在離體后，置于適宜的環(huán)境內，仍能進行良好的節(jié)律性運動，但其收縮很緩慢，節(jié)律性遠不如心肌規(guī)則。胃平滑肌對電刺激較不敏感，但對于牽張、溫度和化學刺激則特別敏感，輕微的刺激?？梢饛娏业氖湛s。胃平滑肌的這一特性是與它所處的生理環(huán)境分不開的，胃內容物對平滑肌的牽張、溫度和化學刺激是引起內容物推進或排空的自然刺激因素。

5.方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠胃平滑肌細胞采用膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測：

公司實驗室分離的大鼠胃平滑肌細胞經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性可傳5代左右；3代以內狀態(tài)佳

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞保存方法：

（一）細胞凍存

1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液；

2. 取對數生長期的細胞，去除舊培養(yǎng)液，用PBS清洗。

3. 去除PBS，加入適量（覆蓋培養(yǎng)皿表面）把單層生長的細胞消化下來；

4. 離心1000rpm，5min；

5. 去除，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，計數，調節(jié)凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml～1×107/ml；

6. 將細胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml；

7. 在凍存管上標明細胞的名稱，凍存時間及操作者；

8. 凍存：標準的凍存程序為降溫速率-1～-2℃/ min；當溫度達-25℃以下時，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內。

大鼠胃平滑肌細胞

注意事項：

1）、欲冷凍保存之細胞應在生長良好且存活率高之狀態(tài)，約為80～90%致密度。冷凍前檢測細胞是否仍保有其性質，應在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產生。

2）、細胞在液氮中可長期凍存無，而不會影響細胞活力;在-70度可保存數月。

3）、注意冷凍保護劑之品質。DMSO應為試劑級等級，無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產品，如Sigma D-2650)，以5～10 ml小體積分裝，4 ℃避光保存，勿作多次解凍。Glycerol亦應為試劑級等級，以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內使用，因長期儲存后對細胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液，可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細胞的損傷。緩慢逐滴加入細胞懸液是使細胞逐步適應高滲，可降低細胞受損。DMSO可能引起部分白血病細胞株的分化，可換用10%甘油凍存。

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操作步驟：

1）、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養(yǎng)基，使細胞處于指數生長期。

2）、配制冷凍保存溶液(使用前配制)：另取一離心管，加入培養(yǎng)基、血清，逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度，即制成雙倍的凍存液，置于室溫下待用。

3）、離心收集培養(yǎng)之細胞，用加血清的培養(yǎng)基重懸起細胞，取少量細胞懸浮液(約0. 1 ml)計數細胞濃度及凍前存活率。

4）、取與細胞懸液等量的凍存液，緩慢逐滴加入細胞懸液，并晃動試管，制成細胞凍存懸液(DMSO后濃度為5～10%)，使細胞濃度為1～5×106cells/ ml，混合均勻，分裝于已標示之冷凍保存管中，1～2 ml/vial，并取少量細胞懸浮液作污染檢測。嚴密封口后，注明細胞名稱、代數、日期。然后進行凍存。