大鼠肺泡巨噬細胞購買細胞注意事項：

1.收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。

2.仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件*。若由于培養(yǎng)條件不*而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由客戶自行承擔。

3.用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜，隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常，請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細胞無活力，請拍下照片及時和我們

4.靜置細胞貼壁后，請將細胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出，留 6~8mL維持細胞正常培養(yǎng)，待細胞匯合度 90%左右時正常傳代。

5.請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。

6.建議客戶收到細胞后前 3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通交流。

細胞名稱：大鼠肺泡巨噬細胞
培養(yǎng)條件：F12K培養(yǎng)基(SIGMA)+20%FBS
英文簡稱：NR8383
種屬：大鼠

1.取出細胞瓶,75%酒精消毒后拆下封口膜，放入37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2.待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
 
3.細胞傳代：吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS清洗細胞一次。

4.加入0.125%胰蛋白酶消化液約 1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃消化   3min左右；顯微鏡下
觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養(yǎng)液終止消化。

5.用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2或  1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的
*培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

6.待細胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們，告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

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