蛋白定量檢測服務(wù)蛋白定量介紹編輯
蛋白質(zhì)的定量分析是生物化學(xué)和其他生命學(xué)科員常涉及的分析內(nèi)容。在生化實(shí)驗(yàn)中，對樣品中的蛋白質(zhì)進(jìn)行準(zhǔn)確可靠的定量分析，是經(jīng)常進(jìn)行的一項(xiàng)非常重要的工作。蛋白質(zhì)是一種十分重要的生物大分子，它的種類很多，結(jié)構(gòu)不均一，分子量又相差很大，功能各異，這樣就給建立一個(gè)理想而又通用的蛋白質(zhì)定量分析的方法帶來了許多具體的因難。
現(xiàn)測定蛋白質(zhì)含量方法有很多。
① 根據(jù)物理性質(zhì)：紫外分光光度法
② 根據(jù)化學(xué)性質(zhì)：凱氏定氮法、雙縮脲法、Folin-酚試劑法（Lowry法）、BCA法、膠體金法。
③ 根據(jù)染色性質(zhì)：考馬斯亮藍(lán)染色法、銀染法。
④ 根據(jù)其他性質(zhì)：熒光法。 [3] 
蛋白定量分析也就涉及到生產(chǎn)科研的多個(gè)領(lǐng)域及行業(yè)，也是生物學(xué)科、食品檢驗(yàn)及摻假摻偽、臨床檢驗(yàn)、診斷疾病和質(zhì)量檢驗(yàn)中常見的方法。
蛋白定量的測試方法有很多種，其中較為常見的有五種，分別是Bradford法、Bradford斑點(diǎn)試驗(yàn)、Coomassie 斑點(diǎn)試驗(yàn)、紫外分光度檢測法及BCA法這五種。當(dāng)然，每種方法適用的情況都有所不同。 [4] 
Bradford法
該方法用于大多數(shù)蛋白質(zhì)定量是相當(dāng)精確的，特別是用于小分子多肽定量。如核糖核酸酶或溶菌酶等。但是，去污劑的濃度超過0.2%則影響定量結(jié)果。如TritonX-100，SDS，NP-40等。
Bradford斑點(diǎn)試驗(yàn)
該方法特別適用于檢測洗脫組分，以定位蛋白洗脫液。例如檢測洗脫液的吸附力的強(qiáng)弱。
Coomassie 斑點(diǎn)試驗(yàn)
該方法特別適用于檢測洗脫組分以定位蛋白洗脫液。例如檢測洗脫液的吸附力的強(qiáng)弱。
紫外分光度檢測法
蛋白質(zhì)紫外光吸光率是所有的蛋白質(zhì)定量方法中快的方法。通常在280nm光波長下讀數(shù)。其在280nm光波長下的大吸光率主要處決于酪氨酸和色氨酸的存在。在205nm光波長的吸收也常用到。其在205nm光波長下的大吸光率主要處決于肽鏈，盡管氨基酸也有影響。另外，一個(gè)主要的優(yōu)點(diǎn)是在測定蛋白質(zhì)濃度時(shí)，樣本不會遭到損害。
BCA法
BCA法特點(diǎn)： 1、靈敏度高，檢測濃度下限達(dá)到25μg/ml，小檢測蛋白量達(dá)到0.5μg，待測樣品體積為1-20μl 。 2、測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的去污劑等化學(xué)物質(zhì)的影響，可以兼容樣品中高達(dá)5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween 20，60，80。 3、 在20-2000μg/ml濃度范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系。 4、 檢測不同蛋白質(zhì)分子的變異系數(shù)遠(yuǎn)小于考馬斯亮藍(lán)法蛋白定量。 5.、受螯合劑和略高濃度的還原劑的影響：EDTA小于10mM。DTT小于1mM巰基乙醇低于1mm。 [5] 
蛋白定量檢測服務(wù)
蛋白測定試劑盒和比色皿：可允許通過修改 Bradford 和 Lowry 方法進(jìn)行蛋白測量。
分光光度法：bio-rad SmartSpec Plus 是一種紫外/可見分光光度計(jì)，適用于多種定量應(yīng)用。
熒光測定法：臺式 VersaFluor 熒光計(jì)可容納支持大范圍激發(fā)和發(fā)射波長的過濾器。 [6]