*檢測(cè)卡用于快速檢測(cè)水產(chǎn)(魚(yú)、蝦)組織中的*代謝物殘留,整個(gè)檢測(cè)過(guò)程需要2小時(shí)左右,適用于各類(lèi)企業(yè)及檢測(cè)機(jī)構(gòu)。*檢測(cè)卡檢測(cè)限為 1.0 μg/kg。
1、*檢測(cè)卡檢測(cè)原理
*檢測(cè)卡應(yīng)用了競(jìng)爭(zhēng)抑制免疫層析的原理,樣本中的*代謝物在流動(dòng)的過(guò)程中與膠體金標(biāo)記的特異性單克隆抗體結(jié)合,抑制了抗體和NC膜檢測(cè)線上*代謝物-BSA偶聯(lián)物的結(jié)合。如果樣本中*代謝物含量大于 1.0 μg/kg,檢測(cè)線T比質(zhì)控線C淺或者T線不顯色,結(jié)果為陽(yáng)性。反之,檢測(cè)線T顯色與質(zhì)控線C線相當(dāng)或者比C線深,結(jié)果為陰性。
2、 *檢測(cè)卡產(chǎn)品組成
名稱(chēng) | 數(shù)量 | 名稱(chēng) | 數(shù)量 |
*檢測(cè)卡 (含酶標(biāo)孔) | 10塊 | 萃取劑 | 10瓶 |
1M鹽酸 | 1瓶 | 樣品復(fù)溶液 | 1瓶 |
衍生化試劑 | 1瓶 | 正己烷 | 1瓶 |
提取劑 | 1瓶 | 一次性吸管 | 10支 |
1M 氫氧化鈉 | 1瓶 | 說(shuō)明書(shū) | 1份 |
3、 *檢測(cè)卡樣品收集及處理
魚(yú)、蝦、蟹等水產(chǎn)收集于干凈的容器或自封袋中;若不能及時(shí)送檢,樣本應(yīng)該去除脂肪,用剪刀剪碎或者用絞肉機(jī)攪碎后,分裝保存于-20℃下,忌反復(fù)凍融。
樣本處理
(1)取一定的組織(魚(yú)、蝦)去除脂肪后,用剪刀剪碎或者用絞肉機(jī)攪碎;
(2)取2 g已處理待測(cè)樣品于50 mL離心管中,依次加入4 mL去離子水,0.5 mL1M鹽酸,0.2 mL衍生化試劑,震蕩混勻3分鐘;
(3)60℃水浴條件下孵育 1小時(shí);
(4)取出后,依次加入5 mL提取劑,0.4 mL1M氫氧化鈉,1瓶萃取劑,震蕩混勻1分鐘;
(5)4000轉(zhuǎn)離心5分鐘,取上層液3 mL至10 mL離心管中,于60 ℃下,利用氮?dú)饣蚩諝鈱⑷芤捍蹈桑?/p>
(6)加入1 mL正己烷,震蕩混勻 1分鐘,再移液器準(zhǔn)確加入500 μL樣品復(fù)溶液震蕩混勻1分鐘;
(7)4000轉(zhuǎn)離心1分鐘(如果分層不明顯可延長(zhǎng)離心時(shí)間至5分鐘)或靜置至明顯分層,下層液待測(cè)。
4、 *檢測(cè)卡操作步驟以及結(jié)果判讀
(1)測(cè)試前將未開(kāi)封的*檢測(cè)卡及待檢樣品溶液恢復(fù)至室溫;
(2)從原包裝鋁箔袋中取出*檢測(cè)卡和酶標(biāo)孔,在半小時(shí)內(nèi)使用;
(3)用移液器吸取待檢樣品溶液100 μL于酶標(biāo)孔,反復(fù)吹打至孔內(nèi)紅色物質(zhì)*溶解,等待反應(yīng) 5分鐘;
(4)將*檢測(cè)卡平放,吸取孔內(nèi)所有溶液滴加到加樣孔中,加樣后開(kāi)始計(jì)時(shí);
(5)反應(yīng)5-8分鐘根據(jù)示意圖判斷結(jié)果,其它時(shí)間判讀無(wú)效;
陰性結(jié)果 : T線比C線深,或一樣深,表示樣品*代謝物濃度低于其靈敏度;
陽(yáng)性結(jié)果 : T線比C線淡,表示樣品*代謝物濃度高于其靈敏度;
無(wú)效反應(yīng): 如果測(cè)試結(jié)果C線未出現(xiàn),表示此試劑已失效。
5、 *檢測(cè)卡儲(chǔ)存及有效期
*檢測(cè)卡應(yīng)在2℃~30℃陰涼避光干燥處儲(chǔ)存,切勿冷凍,有效期為12個(gè)月,生產(chǎn)日期及有效期見(jiàn)包裝盒。
6、 *檢測(cè)卡注意事項(xiàng):
(1)檢測(cè)過(guò)程必須在20℃~30℃環(huán)境下進(jìn)行;
(2)檢測(cè)時(shí)請(qǐng)配戴手套;
(3)切勿食用配備的試劑;
(4)請(qǐng)勿使用過(guò)期的*檢測(cè)卡;
(5)盡量不要觸摸*檢測(cè)卡*的白色膜面;
(6)切勿重復(fù)使用配備的滴管,以免交叉污染。